Peralatan Bahan Cara Kerja

8. Masukkan botol sampel ke dalam termos yang telah diisi dengan es. 9. Kirim sampel secepatnya ke laboratorium untuk dilakukan pemeriksaan.

3.6.2.2 Prosedur Pemeriksaan Sampel di Laboratorium

Adapun tahap pemeriksaan sampel di laboratorium adalah sebagai berikut Salmi, 2006 :

1. Peralatan

a. Autoclave b. Cawan petri diameter 90-100 mm dan diameter 140-150 mm c. Gelas sediaan d. Gelas ukur 100 ml e. Inkubator lemari pengeram suhu 37 ºC dan 42-43 ºC f. Kapas g. Lampu Bunsen h. Pipet ukur 1 ml dan 10 ml i. Rak tabung reaksi j. Sengkelit ose k. Spidol l. Tabung durham m. Tabung reaksi 18 mm x 180 mm n. Termometer

2. Bahan

a. Adonan telur sebelum diseduh air teh b. Adonan telur sesudah diseduh air teh c. Gula-gula d. MR-VP Medium e. Salmonella Shigella Agar SSA f. Selenite Cystine Broth SCB g. Semi Solid Nutrient Agar h. Triple Sugar Iron Agar TSI Agar i. Urea Broth

3. Cara Kerja

a. Penyiapan dan homogenisasi sampel Sampel yang ada di dalam botol lebih dahulu dikocok 25 kali. Ambil dengan pipet sebanyak 25 ml cuplikan sampel ke dalam Erlenmeyer atau wadah lain yang sesuai yang telah berisi 225 ml larutan pengencer 1:10. Kemudian dikocok beberapa kali hingga homogen. Larutan pengencer dalam homogenisasi sampel ini yaitu Buffered Peptone Water BPW. b. Pra-pengkayaan pre-enrichment 1 Pindahkan contoh yang telah dihomogenisasi secara aseptik ke dalam botol 500 ml steril. 2 Inkubasikan pada 36 ºC selama 16-20 jam. c. Pengkayaan enrichment 1 Pipet 10 ml biakan pra-pengkayaan ke dalam 100 ml Seletine Cystine Broth. 2 Inkubasikan pada suhu 35-37 ºC selama 24 jam. d. Penanaman pada perbenihan pilihanselektif 1 Pindahkan biakan pengkayaan dengan cara menggoreskan masing- masing biakan dengan sengkelit ke dalam cawan petri yang berisi SSA. 2 Inkubasikan pada suhu 37 ºC selama 24 jam. 3 Amati tersangka koloni Salmonella sp. pada media dengan cirri-ciri koloni tak berwarna sampai merah muda, bening sampai buram. e. Uji Biokimia Dari koloni tersangka Salmonella sp. ditanam pada TSIA, Indol, Methyl Red, Voges Proskauer, Citrat Simmon, Semi Solid dan gula-gula selama 24 jam pada suhu 37 ºC kecuali semi solid pada suhu kamar dan reaksi biokimia dapat dilihat pada tabel berikut ini. Tabel 3.1 Identifikasi Salmonella sp. dengan Semi Solid dan Gula-Gula Pendek TSIA Mt I G VP CS S L Ml Gl MR Salmonella KM H 2 KM H S + 2 KM H S +- 2 KM H S ++ 2 + S - +g +g +g - - - - + + + + - - - - + + + + - - - - - - - - - - - - + + + + + + + + S. typhi S. enteritidis S. paratyphi B,C S. paratyphi A Sumber : Salmi, 2006 Keterangan : +- : positif atau negatif - : negatif K : Kuning asam M : Merah basa g : gas Mt : Monitol I : Indol G : gerak VP : Voges Proskauer CS : Citrat Simmon S : Sukrosa L : Laktosa Ml : Maltosa Gl : Glukosa MR : Metil Red

3.7 Aspek Pengukuran