g Reaktor berpengaduk multi-tahap, yang terdiri dari tabung kaca, motor
pengaduk buatan Ika-Laboratory
®
dan 2 dua jenis pengaduk.
3.2 Tahapan Penelitian
Pelaksanaan penelitian terdiri dari tiga tahapan pekerjaan penelitian yaitu: 1
Penelitian Pendahuluan, 2
Penelitian Optimasi, 3
Penelitian Pengembangan Proses
3.2.1 Penelitian pendahuluan
Penelitian pendahuluan bertujuan untuk menentukan nilai terbaik dari masing- masing variabel proses. Variabel proses yang diamati adalah waktu reaksi, jenis dan
konsentrasi enzim, jenis dan rasio pelarut, rasio molar substrat, serta temperatur reaksi. Bagan alir penelitian pendahuluan dan rincian kegiatan ditunjukkan pada Gambar 3.1.
3.2.1.1 Penyediaan bahan
Bahan yang digunakan adalah dua jenis alkanolamina yaitu dietanolamina dan N-metil glukamina dan satu jenis asam lemak yaitu asam laurat.
3.2.1.2 Penetapan variabel
Tahapan – tahapan untuk menetapkan nilai terbaik dari setiap variabel adalah:
a Penentuan waktu reaksi, jenis dan konsentrasi enzim
Amidasi asam laurat dengan alkanolamina diawali dengan melakukan screening dua jenis enzim lipase terimobilisasi yaitu adalah Novozym 435
®
dan Lypozym TL IM
®
. Penelitian dilakukan pada rasio mol amina : asam laurat 2:1, rasio pelarut n- heksan:asam laurat 2:1 vb, konsentrasi enzim:asam laurat 10 bb dan temperatur
30
o
C. Selama reaksi berlangsung dilakukan aliquot setiap 4 jam sekali untuk di analisis bilangan asamnya, dan setelah konversi asam lemak konstan, reaksi dihentikan. Waktu
reaksi pada saat konversi asam lemak telah konstan ditetapkan sebagai nilai terbaik. Jenis enzim yang memberikan nilai konversi asam lemak yang tinggi dipilih untuk
penelitian selanjutnya. Level konsentrasi enzim yang dipilih, ditentukan dengan mengamati nilai persen konversi asam lemak pada 5 level konsentrasi enzim:asam
laurat bb yaitu 6, 8, 10, 12 dan 14 Herawan, 2004.
Gambar 3.1 Bagan Alir Penelitian Pendahuluan
b Penentuan jenis dan rasio pelarut
Keberadaan pelarut dalam sebuah reaksi yang melibatkan biokatalis akan mempengaruhi aktifitas dan stabilitas reaksi enzimatik. Pada penelitian ini dilakukan
percobaan terhadap empat jenis pelarut organik yaitu n-heksan, isopropanol, terbutanol dan tert amilalkohol, pada rasio mol amina terhadap asam laurat 2:1, konsentrasi
enzim:asam laurat 10 bb, rasio pelarut:asam laurat 2:1 vb dan temperatur 30
o
C.
Mulai
2. PENETAPAN VARIABEL Waktu reaksi,
Jenis dan konsentrasi enzim, Jenis dan rasio pelarut,
Rasio molar substrat, Temperatur reaksi.
3. SETUP PERALATAN Labu bertutup, Hot
plate, Pengaduk magnetik,
Penangas minyak. 1. PENYEDIAAN
BAHAN Alkanolamina,
Asam laurat, Enzim imobil.
4. SINTESIS ALKANOLAMIDA Sintesis lauroil-dietanolamida
SIntesis lauroil-N-metil glukamina 5. PEMURNIAN PRODUK
6. ANALISIS DATA Analisis bilangan asam,
konversi asam laurat
LUARAN, NILAI TERBAIK DARI:
Waktu reaksi Jenis dan konsentrasi enzim
Jenis dan rasio pelarut Rasio molar substrat
Temperatur reaksi
Selesai
Pelarut yang memberikan persen konversi asam laurat terbesar selanjutnya ditentukan rasionya dengan mengamati empat nilai rasio pelarut:asam laurat vb yaitu 1:1, 2:1,
3:1, 4:1.
c Penentuan rasio molar substrat
Penentuan nilai rasio molar substrat dilakukan dengan menggunakan 5 nilai rasio molar amina:asam laurat yaitu 1:1, 2:1, 3:1, 4:1 dan 5:1. Variabel tetap adalah
konsentrasi enzim 10 bb asam laurat, rasio pelarut:asam laurat 2:1 vb dan temperatur 30
o
C.
d Penentuan temperatur reaksi
Penentuan temperatur reaksi dilakukan dengan menggunakan 4 nilai temperatur yaitu 30, 40, 50 dan 60
o
C. Variabel tetap adalah konsentrasi enzim:asam laurat 10 bb, rasio pelarut:asam laurat 2:1 vb dan rasio mol amina terhadap asam laurat 2:1.
3.2.1.3 Setup peralatan
Kategori