26
responden, Desa Jagalempeni sebanyak 25 responden dan Desa Kedung Uter sebanyak 26 responden. Total keseluruhan yang menjadi obyek penelitian
berjumlah 79 orang responden. Lokasi penelitian dipilih sesuai dengan tujuan penelitian ini, maka
kecamatan dipilih secara purposif : 1 wilayahnya merupakan penghasil bawang merah 2 wilayahnya merupakan daerah dengan aktivitas penyemprotan tinggi
dan rendah, 3 banyaknya petani berkaitan dengan penggunaan pestisida, 4 ma ta pencaharian atau kegiatan utama sebagai petani.
Responden dalam penelitian ini adalah petani yang menangani berhubungan dengan pestisida dan berjenis
kelamin laki-laki. Dengan cara ini diharapkan responden yang terpilih merupakan representasi dari petani yang terkait dengan pestisida di daerah pertanian bawang
merah. Penelitian ini merupakan penelitian sewaktu, karena tidak dilakukan pemeriksaan dahulu pada calon responden keadaan sebelum melakukan
penyemprotan dengan pestisida.
3.4. Pengumpulan Data
Data primer diperoleh melalui pengamatan langsung di lapangan, pengambilan sampel darah petani dan melakukan wawancara pada petani dengan
memberikan pertanyaan berstruktur melalui pengisian kuesioner.
3.4.1. Data Aktivitas Enzim Asetilkolinesterase AChE dan Enzim Glutamat Piruvat Transaminase GPT
Untuk mengukur derajat keracunan pestisida organo fosfat dan karbamat dilakukan pemeriksaan kandungan enzim asetilkolinesterase AChE dalam darah
petani yang terpilih kelompok sampel . Pada penelitian ini juga dilakukan pengukuran enzim glutamat piruvat transaminase GPT untuk menyingkirkan
kemungkinan penurunan kandungan enzim AChE bukan karena pengaruh pestisida. Selain itu juga dilakukan pemeriksaan yang sama pada sejumlah orang
27
dari daerah yang sama tetapi tidak berhubungan sama sekali dengan pestisida, kelompok ini disebut kelompok kontrol.
Penentuan kandungan enzim asetilkolinesterase ini dilakukan dengan metode Elman, berdasarkan prinsip enzim asetilkolinesterase mengkatalisis proses
hidrolisis S butiril thiocholine menjadi butirat dan thiocholine. Thiocholine yang terbentuk akan mereduksi 5,5 Dithiobis 2-nitrobenzoat menjadi 4-mercapto 2,
nitrobenzoat yang berwarna kuning. Intensitas warna yang terbentuk diukur dengan spektrofotometer.
Penentuan kadar enzim asetilkolinesterase dilakukan dengan mengambil sampel darah pada responden yang terpilih sebanyak 2 ml dan dimasukan dalam
tabung stril yang telah diberi heparin secukupnya. Darah yang sudah diambil dicentrifuge selama 20 menit dengan kecepatan 3000 rpm. Kemudian diambil
yang jernih dan dimasukan dalam tabung yang jernih untuk pemeriksaan di laboratorium dengan spektrofotometer pada panjang gelombang 400420 nm
dalam suhu kamar. Penentuan kadar enzim glutamat piruvat transaminase GPT dilakukan
dengan spektrofotometer Kit Boehringer Mannheim. Penentuan kandungan enzim GPT ini dilakukan untuk menyingkirkan kemungkinan penurunan AChE bukan
karena keracunan pestisida.
3.4.2. Data Sosial Ekonomi
Pengumpulan data sosial ekonomi dilakukan dengan wawancara kepada petani yang terpilih di setiap desa menggunakan kuesioner, yang meliputi mata
pencaharian, tingkat pendidikan, tingkat pendapatan, dan sebagainya.
3.4.3. Data Kesehatan Petani
