Efni Ulina Sirait : Hygiene Sanitasi Pengolahan Dan Pemeriksaan Escherichia Coli Dalam Susu Kedelai Pada Usaha Kecil Di Kota Medan 2009, 2010.
3.6 Cara Pemeriksaan Laboratorium
Pemeriksaan Most Probable Number MPN dilakukan dengan tabung ganda yang terdiri :
1. Test Perkiraan Presumptive Test
2. Test Penegasan Confirmative Test
3.6.1 Test Perkiraan Presumptive test
Media yang digunakan adalah Lactose Broth LB Cara Pemerikasaan :
a. Siapkan 70 tabung reaksi yang masing-masing berisi media lactose broth
sebanyak 10 ml. Tabung disusun pada rak tabung reaksi dan diberi tanda b.
Masukkan tabung durham dengan posisi terbalik ke dalam tabung reaksi c.
Masukkan ke dalam autoclave dengan suhu 121 C selama 15 menit
d. Ambil bahan pemeriksaan sampel yang telah diencerkan yang telah
disiapkan dengan pipet kemudian masukkan ke dalam : Tabung 1 sd 5 masing-masing sebanyak 10 ml
Tabung ke-6 sebanyak 1 ml Tabung ke-7 sebanyak 0,1 ml 2 tetes
Masing-masing tabung tersebut digoyang-goyangkan agar specimen dan media tercampur.
e. Inkubasikan pada suhu 34°C-37°C selama 2x24 jam
Setelah 1x24 jam diperiksa ada tidaknya pembentukan gas pada tabung Durham. Catat semua tabung yang menunjukan peragian lactose
Efni Ulina Sirait : Hygiene Sanitasi Pengolahan Dan Pemeriksaan Escherichia Coli Dalam Susu Kedelai Pada Usaha Kecil Di Kota Medan 2009, 2010.
pembentukan gas. Bila terbentuk gas pada tabung dilanjutkan dengan test penegasan
Apabila test dalam waktu 1x24 jam tidak membentuk gas, dimasukkan ke inkubator kembali pada suhu 37°C selama 24 jam. Bila
terbentuk gas pada tabung Durham maka test dilanjutkan dengan test penegasan. Bila test -, berarti tidak ada bakteri yang dapat meragikan
lactose, salah satunya adalah E. coli dan tidak perlu dilakukan test penegasan.
3.6.2 Test Penegasan Confirmative test
Media yang digunakan adalah Brilliant Green Lactose Bile Broth BGLB 2 . Test ini untuk menegaskan hasil positif dari test perkiraan.
Cara Pemeriksaan : a.
Dari tiap-tiap tabung presumptive yang positif, dipindahkan 1ose ke dalam tabung confirmative yang berisi 10 ml BGLB 2
b. Tabung confirmative diinkubasikan pada suhu pada suhu 44°C selama 24
jam untuk memastikan adanya coliform tinja. c.
Pembacaan dilakukan setelah 2x24 jam dengan melihat jumlah tabung BGLB 2 yang menunjukan positif gas.
3.6.3 Pembacaan Hasil Pemeriksaan
