kotak selama 7 hari. Pengukuran absorbansi dilakukan setiap hari dengan spektrofotometer pada panjang gelombang 520 nm dan dengan khromameter.
3.3.4.3 Stabilitas terhadap Suhu Pemanasan
Larutan antosianin tanpa kopigmen dan larutan antosianin ekstrak yang telah ditambah kopigmen dimasukkan ke dalam botol gelap dan diinkubasi pada
suhu 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, dan 100
o
C, selama 2 jam kemudian diukur absorbansinya dengan spektrofotometer pada panjang gelombang 520 nm yang
merupakan panjang gelombang maksimum antosianin kulit buah duwet pada pH 3 dan juga dengan khromameter setiap interval waktu 30 menit.
3.3.4.4 Pengaruh Suhu Selama Penyimpanan
Larutan antosianin ekstrak dan larutan antosianin ekstrak yang telah ditambah kopigmen dimasukkan ke dalam botol gelap dan disimpan pada suhu
kamar 30
o
C dan suhu dingin 10°C, selama 1 bulan. Kemudian dilakukan pengukuran absorbansi dengan spektrofotometer pada panjang gelombang 520 nm
dan dengan khromameter dengan interval waktu pengamatan 0, 5, 10, 15, 20, 25 dan 30 hari.
3.3.5 Metode Analisis
Pengamatan meliputi analisis total rendemen, konsentrasi antosianin, rendemen antosianin, dan analisis warna dengan khromameter
.3.3.5.1 Total Rendemen Ekstrak Sari et al. 2005
Total rendemen dihitung dalam persen sebagai berat ekstrak yang telah dikeringkan dengan frezee dryer dibagi berat buah duwet basah.
Total Rendemen =
100 ker
× g
duwet buah
Berat g
ing ekstrak
Berat
3.3.5.2 Konsentrasi Antosianin dengan Metoda pH-differential Prior et al.
1998.
Konsentrasi antosianin diukur dengan melarutkan ekstrak kering dalam pelarut yang digunakan untuk ekstraksi dan ditera sampai volume 25 ml.
Sebanyak masing-masing 0.05 ml sampel dimasukkan ke dalam 2 buah tabung reaksi. Tabung reaksi pertama ditambah larutan buffer potasium klorida 0.025 M
pH 1 sebanyak 4.95 ml dan tabung reaksi kedua ditambahkan larutan buffer sodium asetat 0.4 M pH 4.5 sebanyak 4.95 ml. Pengaturan pH dalam pembuatan
buffer potasium klorida dan sodium asetat menggunakan HCl pekat. Absorbansi dari kedua perlakuan pH diukur dengan spektrofotometer pada panjang
gelombang 515 nm dan 700 nm setelah didiamkan selama 15 menit. Nilai absorbansi dihitung dengan rumus : A = [A
515
– A
700 pH 1
– A
515
– A
700 pH
4.5
]. Konsentrasi antosianin dihitung sebagai sianidin-3-glikosida menggunakan
koefisien ekstingsi molar sebesar 29 600 L cm
-1
dan berat molekul sebesar 448.8. Konsentrasi antosianin mgL = A x BM x FP x 1000
ε x 1, dimana A adalah absorbansi, BM adalah berat molekul 448.8, FP adalah faktor pengenceran 5 ml
0.05 ml, dan ε adalah koefisien ekstingsi molar 29 600 L cm
-1
.
3.3.5.3 Rendemen Pigmen Antosianin Sari et al. 2005
Rendeman antosianin dihitung dalam persen yang menyatakan banyaknya antosianin yang terdapat dalam sampel berdasarkan berat basah.
Rendemen antosianin =
100 ×
g sampel
berat g
antosianin i
Konsentras
3.3.5.4 Pengukuran Warna dengan Spektofotometer
Pengukuran absorbansi dilakukan untuk ekstrak antosianin duwet dengan penambahan buffer dan ekstrak antosianin buah duwet. Absorbansi sampel diukur
dengan spektofotometer pada panjang gelombang maksimum antosianin. Panjang gelombang maksimum yang digunakan adalah 520 nm.
3.3.5.5 Analisis Warna dengan Kromameter Francis, 1998
Pengukuran warna pada ekstrak tanpa dan dengan kopigmen yang dilarutkan pada buffer pH 3 dilakukan dengan alat Minolta Chroma Meters CR-
310. Prinsip dari Minolta Chroma Meters adalah pengukuran perbedaan warna melalui pantulan cahaya oleh permukaan sampel. Pengukuran dilakukan dengan
meletakkan sampel di dalam wadah sampel barukuran seragam dan selanjutnya dilakukan pengukuran pada skala nilai L, a, b, dan
o
h. Nilai L menyatakan
