3.6. Pembuatan Soyghurt Koswara, 2006
Susu kedelai hangat 40°C dicampur dengan susu bubuk hingga mencapai total solid 16, ditambahkan gula pasir 2, dan diinokulasikan dengan kultur starter
2-3 Yudhi, 2008. Kemudian dilakukan pengadukan sampai gumpalan starter larut semua dan dimasukkan kedalam wadah tertutup yang berpori, dibagi 3
tempat kemudian masing-masing wadah diinkubasi pada suhu 37°C - 40°C selama 4 jam wadah I, 6 jam wadah II, dan 8 jam wadah III. Diagram alir
pembuatan soyghurt dapat dilihat pada Lampiran F.
3.7. Pemeliharaan Hewan Percobaan
Penelitian ini menggunakan Mencit Mus musculus, L jantan yang sehat strain DD Webster dewasa, jenis kelamin jantan yang sehat, umur 8-11 minggu dengan
berat 22-38 gram sebanyak 36 ekor. Mencit tersebut diperoleh dari Laboratorium Fisiologi Hewan FMIPA Universitas Sumatera Utara Medan dan dibagi dalam
kelompok kontrol negatif, kontrol positif dan perlakuan. Mencit diberi pakan berupa pellet B551 produksi PT. Charoen Pokphan Medan dan dicampur jagung
halus dan minuman air PAM yang diberi setiap hari secara ad-libitum. Kandang mencit dijaga kebersihannnya dan cahaya ruangan dikontrol dan diatur 12 jam
terang dan 12 jam gelap, sedangkan suhu dan kelembaban ruangan dibiarkan berada pada keadaan alamiah Kusmawati, 2008. Sebelum penelitian dimulai,
diajukan permohonan untuk mendapatkan ethical clearance ke komisi Etik Penelitian Hewan di Wilayah Sumatera Utara Medan.
3.8. Perhitungan Jumlah Koloni Bakteri Asam Laktat Suriawiria, 2006
Perhitungan jumlah koloni bakteri starter dengan menggunakan metoda Total Plate Count dan seri pengenceran. Dipipet 1 ml soyghurt dari masing-masing
wadah dimasukkan ke dalam tabung reaksi, kemudian ditambahkan 9 ml larutan NaCl fisiologis. Larutan ini merupakan larutan pengenceran 10
-1
. Kemudian disiapkan 9 tabung masing-masing yang telah diisi dengan 9 ml larutan
pengencer. Dipipet 1 ml pengenceran 10
-1
ke dalam tabung yang telah berisi 9 ml pengencer hingga diperoleh pengenceran 10
-2
. Dikocok sampai homogen,
Universitas Sumatera Utara
dilakukan pengenceran berikutnya hingga pengenceran 10
-10
. Dari setiap pengenceran dipipet 1 ml dimasukkan ke dalam cawan petri yang sudah berisi
media MRS Agar Zahoor et al., 2003. Disebarkan inokulum diatas permukaan media hingga merata. Inkubasi media MRS Agar yang sudah berisi suspensi
soyghurt pada suhu 37°C selama 72 jam dalam suasana fakultatif anaerob inkubator. Dihitung jumlah koloni dengan metode Total Plate Count. Cara
pengenceran seri dapat dilihat pada Gambar 3.1.
Gambar 3.1. Metode Plate Count dan Pengenceran seri Suriawiria, 2005.
3.9. Identifikasi Bakteri Asam laktat Soeharsono, 2010
Kategori