UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
3.4.4 Karakterisasi Niosom
3.4.4.1 Analisis Ukuran Partikel
Suspensi niosom yang telah terbentuk dapat dianalisis ukuran partikel dan distribusi ukuran partikel serta indeks polidispersitasnya oleh Dynamic Light
Scattering DLS dengan menggunakan alat Particle Size Analyzer PSA Dahiya, dkk., 2011. Suspensi niosom diteteskan pada tempat sampel alat PSA
dan dilakukan measuring hingga didapatkan hasil ukuran partikel, distribusi ukuran partikel, dan indeks polidispersitas dari masing-masing formula niosom.
3.4.1.2 Penentuan Persen Efisiensi Penjerapan
Efisiensi penjerapan vesikel ditentukan dengan memisahkan obat bebas dari vesikel penjerap obat dengan menggunakan teknik ultrasentifugasi. Suspensi
niosom disentrifugasi selama 50 menit pada 50.000 rpm dan suhu 4°C dengan tujuan untuk memisahkan obat yang tidak terjerap. Jumlah obat bebas FD
ditentukan pada supernatan. Supernatan hasil sentrifugasi ditetapkan kadarnya dengan menggunakan spektrofotometer UV-Vis Pham, Maalej, Charcosset,
2012. Efisiensi penjerapan EE dihitung dengan rumus :
x 100 3. 3
Keterangan: TD
= total senyawa fenolat yang terdapat dalam formula FD
= jumlah senyawa fenolat yang terdeteksi pada supernatan
a. Pembuatan Larutan Induk Asam Galat dalam PBS
Phophate Buffer Saline
Larutan standar asam galat dengan konsentrasi 1000 ppm mgL dapat dibuat dengan cara 10 mg asam galat standar dilarutkan dalam 1 mL metanol p.a,
lalu ditambahkan PBS phosphate buffer saline di dalam labu ukur 10 mL sampai tanda batas Ratnayani, 2012.
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
b. Penentuan Panjang Gelombang Maksimum Asam Galat dalam PBS
Phophate Buffer Saline
Larutan standar asam galat 40 ppm dibuat dengan cara mengambil 0,2 mL larutan induk asam galat 1000 ppm, lalu dimasukkan ke dalam labu ukur 5 mL,
dan ditambahkan PBS phosphate buffer saline sampai tanda batas. Sebanyak 0,5 mL larutan standar 40 ppm dimasukkan dalam tabung reaksi, kemudian ditambah
0,3 mL reagen Folin Ciocalteu dan 2 mL larutan Na
2
CO
3
15, lalu ditambahkan 2,2 mL PBS phosphate buffer saline. Larutan diinkubasi pada suhu kamar
selama 2 jam. Campuran larutan tersebut kemudian diukur serapannya pada panjang gelombang 400 sampai 800 nm. Hasil yang diperoleh dibuat dalam
bentuk kurva, sebagai sumbu y adalah absorbansi dan panjang gelombang cahaya sebagai sumbu x. Dari kurva tersebut dapat ditentukan panjang gelombang yang
memberikan serapan maksimum Alvian, Susanti, 2012,. Pontis, Costa, Silva, Flach, 2014.
c. Pembuatan Kurva Standar Asam Galat dalam PBS
Phophate Buffer Saline
Larutan standar asam galat dengan konsentrasi 20, 30, 40, 50, 60, 70, dan 80 μ gml dibuat dengan cara mengambil masing-masing sebanyak 0,2 mL; 0,3
mL; 0,4 mL; 0,5 mL; 0,6 mL; 0,7 mL dan 0,8 mL larutan induk asam galat 1000 ppm, lalu dimasukkan ke dalam labu ukur 10 mL, dan ditambahkan PBS
phosphate buffer saline sampai tanda batas. Sebanyak 0,5 mL dari masing- masing seri konsentrasi larutan tersebut dimasukkan dalam tabung reaksi,
kemudian ditambah 0,3 mL reagen Folin Ciocalteu dan 2 mL larutan Na
2
CO
3
15, lalu ditambahkan 2,2 mL PBS phosphate buffer saline. Larutan tersebut diinkubasi selama 2 jam. Semua larutan diukur absorbansinya menggunakan
spektrofotometer UV-Vis pada panjang gelombang 756 nm, kemudian dibuat kurva kalibrasi hubungan antara konsentrasi asam galat μ gml dengan
absorbansi Pontis, Costa, Silva, Flach, 2014.
Kategori