17
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
dapat digunakan pada kromatografi kolom. Dengan menggunakan berbagai jenis lempeng KLT serta sistem pelarut yang berbeda, maka
sistem yang cocok untuk kromatografi kolom dapat diketahui. Informasi ini akan sangat berguna untuk kondisi awal pada tahap pemisahan dan
gradien yang digunakan untuk mengelusi senyawa-senyawa yang sesuai Reid dan Sarker, 2006.
2.8. Metode Spektroskopi dalam Penentuan Struktur
Teknik spektroskopi adalah salah satu teknik analisa kimia-fisika yang mengamati tentang interaksi atom atau molekul dengan radiasi
elektromagnetik.
2.8.1. GCMS
Kromatografi gas dan spektrometer massa dapat digunakan untuk memisahkan komponen dengan memberikan waktu retensi dan puncak
elusi yang dapat dimasukkan ke dalam spektrometer massa untuk memperoleh berat molekul, karakteristik dan informasi fragmentasi
Heinrich, 2004. Spektrometer massa sebagai metode deteksi yang memberikan data yang bermakna, yang diperoleh dari penentuan langsung
molekul zat atau fragmen Heinrich, 2004. Pada data komputer Library search dalam GCMS ini sudah
terdapat ratusan ribu senyawa organik yang sudah didata. Sehingga dapat menghasilkan hasil pengukuran yang mengeluarkan data kemungkinan
senyawa dari sampel yang diuji. Dari data kemungkinan senyawa ini dapat dilihat derajat kemiripannya quality, dengan derajat kemiripan yang lebih
dari 90 dapat dikatakan identik atau sama Kosela S., 2010.
2.8.2. Spektrofotometri IR
Daerah inframerah pada spektrum elektromagnetik membentang luas dari berakhirnya spektrum merah dari spektrum nampak sampai
daerah gelombang mikro. Daerah tersebut meliputi radiasi pada panjang gelombang antara 0,7 dan 500 μm atau pada bilangan gelombang antara
18
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
14.000 dan 20 . Rentang spektrum yang paling banyak digunakan
yaitu daerah pertengahan inframerah mid-infrared yaitu pada daerah 4000 sampai 200
2,5 sampai 5 μm Willard H. et al., 1988.
Hampir semua senyawa yang memiliki ikatan kovalen, baik organik maupun anorganik, menyerap berbagai frekuensi radiasi
elektromagnetik diwilayah inframerah dari spektrum elektromagnetik. Wilayah ini terletak pada panjang gelombang yang berkisar dari sekitar
400 sampai 800 nm Pavia et al., 2008.
2.8.3. Spektrometri Nuclear Magnetic Resonance NMR
NMR merupakan teknik spektroskopi yang mengandalkan sifat magnetik dari inti atom. Ketika ditempakan di daerah magnetik yang kuat,
inti tertentu beresonansi pada sebuah karakteristik frekuensi dalam rentang frekuensi radio dari spektrum elektromagnetik. Sedikit variasi dalam
frekuensi resonansi ini memberi kita informasi yang detail tentang struktur molekul dimana atom berada Jacobsen, 2007.
Informasi yang didapatkan dari spektroskopi inframerah yaitu informasi tentang gugus fungsi yang terdapat didalam struktur suatu
molekul, kemudian data informasi yang didapatkan dari NMR yaitu informasi secara magnetis tentang sejumlah atom yang dimiliki senyawa
tersebut Pavia et al., 2001. Berdasarkan Willard et al. 1988, karakteristik dari penyerapan energi oleh inti yang berputar dalam medan
magnet yang kuat adalah ketika diiradiasi kedua pada daerah yang lemah akan membentuk garis yang tegak lurus, dari hal tersebut maka akan
diperoleh infromasi tentang identifikasi dari konfigurasi suatu atom dalam suatu molekul.
2.9. Uji Antiinflamasi
Untuk pengujian antiinflamasi suatu ekstrak kasar yang didalamnya banyak senyawa misalnya 100 dibutuhkan suatu metode
yang mudah yaitu menggunakan Bovine Serum Albumin BSA. Efek