115
INSTRUKSI KERJA METODE COLIFORM 1. Tujuan
Instruksi kerja ini digunakan sebagai pegangan dalam pelaksanaan pengujian bakteri fecal coliform dalam air dengan menggunakan metode Most Propable Number
MPN.
2. Ruang Lingkup
Untuk melaksanakan pengujian bekteri Coliform dalam air.
3. Acuan
American Public Health Association. Standar Methods for Examination of water Wastewater 21 st Edition. APHA. USA. 2005. Hal 9-48-9-50 Part 9221A-9221C.
4. Peralatan dan Bahan 4.1 Alat
1. Inkubator 2. Tabung reaksi
3. Inokulum equipment 4. Pipet ukur 10 ml
5. Pipet ukur 1 ml
4.2 Bahan
1. Lauryl Tryptose Broth LTB 2. Brilliant Green Lactose Broth
3. Larutan pengencer
5. Cara Uji
Universitas Sumatera Utara
116
5.1 Tes Perkiraan
1. Air minum: Disiapkan 10 tabung dengan volume media LTB 10 ml untuk volume sampel
10 ml dengan konsentrasi media LTB: 71,2 grL Air bukan air minum
Disiapkan 5 porsi tabung ubtuk setiap volume sampel : 10; 1; 0,1 ml atau pengenceran yang lebih tinggi lagi untuk air yang tercemar atau air
pengolahan. Dengan konsentrasi media LTB: 71,2 grL = 10 ml sampel.
Dengan konsentrasi media LTB: 35,6 grL = 1; 0,1 ml sampel. 2. Masukkan sampel yang sudah dihomogenkan secara aseptik ke dalam
masing-masing tabung media LTB. 3. Tabung-tabung dalam rak digoyang, supaya sampel air dengan media
bercampur rata. 4. Inkubasikan pada suhu 35
C ± 0,5 C selama 24 ± 2 jam.
Reaksi dinyatakan positif bila terbentuk asam dan gas dalam tabung fermentasi. Bila tidak ada reaksi asam atau gas, inkubasi kembali sampai 48
jam± 3 jam. 5. Bila pada tabung fermentasi tidak terbentuk asam dan gas dalam waktu 48
jam± 3 jam, maka tes perkiraan dinyatakan negatif, bila pada tabung fermentasi terbentuk asam dan gas dalam waktu 48 jam± 3 jam, maka ter
perkiraan dinyatakan positif. 6. Kemudian tabung-tabung yang positif dilanjutkan ke tes penegasan.
Universitas Sumatera Utara
117
5.2 Tes Penegasan
1. Setiap tabung yang positif pada tes perkiraan dikocok, kemudian dipindahkan dengan oselop ke dalam EC Broth.
2. Inkubasikan pada inkubator suhu 35 C ± 0,5
C selama 24 ± 2 jam Reaksi dinyatakan positif bila terbentuk gas dalam tabung fermentasi. Bila
tidak ada reaksi gas, diinkubasikan kembali sampai 48 jam ± 3 jam 3. Bila pada tabung fermentasi tidak terbentuk gas dalam 48 jam ± 3 jam, maka
tes penegasan dinyatakan negative, bila pada tabung fermentasi terbentuk gas dalam waktu 48 jam ± 3 jam, maka tes penegasan dinyatakan positif.
Hitung MPN total coliform dengan menggunakan tabel MPN dari jumlah tabung BGLB yang positif, dari jumlah tabung BGLB yang positif dibaca
pada tabel MPN.
5.3 Cara pengujian dengan pengenceran:
