45
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
glukosa dideteksi dengan perubahan warna pH indikator yaitu fenol red dari merah menjadi kuning sedangkan produksi H
2
S dideteksi dari perubahan warna media menjadi hitam.
Bakteri Escherichia coli akan menunjukkan hasil AA,G dimana permukaan media kuning dan bagian dasar kuning, pecah atau terangkat karena
produksi gas akan tetapi pada beberapa strain bakteri Escherichia coli mampu mereduksi sulfur yang kemudian menghasilkan H
2
S. Pada sebuah penelitian, tedapat 12 strain Escherichia coli yang menunjukkan perubahan warna menjadi
kuning pada bagian permukaan media dan bagian dasar, 5 strain yang menunjukkan warna merah pada permukaan media dan warna kuning pada bagian
dasar media, dan 17 strain positif menghasilkan H
2
S pada bagian dasar media. Menurut Darland dan Davis 1973, lebih dari 200 isolat yang memproduksi H
2
S merupakan Escherichia coli Layne et al., 1971; Leboffe dan Pierce, 2010; Maker
dan Washington II, 1974; Park HE et al., 2015.
4.4.6. Hasil Uji Produksi H
2
S
Media yang digunakan pada uji indol yaitu media Sulfide-Indole-Motility SIM yang merupakan media multi test. Pada pengujian sampel D2, media SIM
berubah warna menjadi hitam Gambar 4.12, hal ini menunjukkan bahwa bakteri menghasilkan H
2
S. Meskipun Escherichia coli tidak khas memproduksi H
2
S namun strain Escherichia coli yang memproduksi H
2
S sudah banyak diteliti secara luas. Salah satu strain yang memproduksi H
2
S yaitu diisolasi dari seseorang yang mengalami infeksi saluran kemih, selain itu juga ditemukan pada
feses babi. Lebih dari 200 isolat yang memproduksi H
2
S telah diidentifikasi sebagai Escherichia coli Darland dan Davis, 1973; Jones et al., 1978; Layne et
al., 1971; Maker dan Washington II, 1974; Park HE et al., 2015. Media SIM mengandung pepton dan tiosulfat yang merupakan sumber
sulfur dan garam logam berat yaitu besi amonium sulfat yang berfungsi sebagai indikator H
2
S. H
2
S diproduksi melalui reduksi sulfur anorganik seperti tiosulfat ataupun sulfur organik seperti sistein. Hasil reduksi tersebut kemudian akan
bereaksi dengan besi amonium sulfat membentuk endapan berwarna hitam yang
46
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
tidak larut yang akan terlihat secara makroskopis setelah 18-24 jam. Perubahan media seluruhnya menjadi hitam juga menunjukkan bahwa bakteri tersebut
bergerak seperti sifat Escherichia coli Haque dan Sao, 2013; Jones et al., 1978; Layne et al., 1971; Maker dan Washington II, 1974; Park HE et al., 2015.
Gambar 4.12 Gambar A merupakan media SIM yang telah diinokulasi bakteri sebelum
diinkubasi dan Gambar B media SIM yang telah diinokulasi bakteri dan diinkubasi selama 24 jam yang kemudian terjadi perubahan warna media menjadi hitam, Gambar C merupakan media
TSIA yang telah diinokulasi bakteri sebelum diinkubasi dan Gambar D media TSIA yang telah diinokulasi bakteri dan diinkubasi selama 48 jam yang kemudian terjadi perubahan warna media
menjadi hitam pada dasar tabung.
4.4.7. Hasil Uji Motilitas
Hasil uji motilitas yang dilakukan pada sampel D2 menunjukkan bahwa bakteri tersebut bersifat motil karena pada masa inkubasi 24 jam media berubah
menjadi keruh. Media yang digunakan pada uji ini yaitu media SIM Sulfide- Indole-Motility. Media ini digunakan karena merupakan media semisolid yang
dirancang untuk mendeteksi motilitas bakteri. Media semi solid mengandung agar dengan konsentrasi 1,5-0,4 yang dianggap mampu menjaga bentuknya ketika
ada pergerakan bakteri. Apabila suatu bakteri bersifat motil atau dapat bergerak ditunjukkan dengan adanya pertumbuhan pada area tusukan yang ditandai dengan
perubahan media menjadi lebih keruh Leboffe dan Pierce, 2011. A
D C
B
47
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
Berikut ini merupakan hasil uji secara keseluruhan semua sampel air minum isi ulang dan hasil uji IMViC Escherichia coli menurut
SNI 01-2897-1992
:
Tabel 4.6 Uji keseluruhan sampel air minum isi ulang depot di Kelurahan Pondok Cabe Ilir
dan hasil uji Escherichia coli menurut SNI 01-2897-1992 D1
D2 D3
D4 D5
Tipikal E.Coli
Atipikal E.Coli
Uji sangkaan 0-0-0
1-0-0 0-0-0
0-0-0 0-0-0
Uji konfirmasi
Tidak dilakukan
1-0-0 Tidak
dilakukan Tidak
dilakukan Tidak
dilakukan APMmL
3 4
3 3
3 Uji
pada media
Escherichia coli broth
Tidak dilakukan
Terbentuk gelembung
Tidak dilakukan
Tidak dilakukan
Tidak dilakukan
Uji pada
media Eosin Methylene
Blue Agar Tidak
dilakukan Koloni
berwarna hijau kilap
logam Tidak
dilakukan Tidak
dilakukan Tidak
dilakukan
Pewarnaan Gram
Tidak dilakukan
Berwarna merah,
bentuk batang
Tidak dilakukan
Tidak dilakukan
Tidak dilakukan
Indol Tidak
dilakukan +
Tidak dilakukan
Tidak dilakukan
Tidak dilakukan
+ -
Merah metil Tidak
dilakukan +
Tidak dilakukan
Tidak dilakukan
Tidak dilakukan
+ +
Voges Proskauer
Tidak dilakukan
- Tidak
dilakukan Tidak
dilakukan Tidak
dilakukan -
- Sitrat
Tidak dilakukan
- Tidak
dilakukan Tidak
dilakukan Tidak
dilakukan -
- Triple Sugar
Iron Tidak
dilakukan AA, G,
H
2
S Tidak
dilakukan Tidak
dilakukan Tidak
dilakukan Motilitas
Tidak dilakukan
+ Tidak
dilakukan Tidak
dilakukan Tidak
dilakukan
