Uji Sangkaan Metode Angka Paling Mungkin APM
16
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
menit. Dicuci kembali menggunakan air mengalir dan dikering anginkan. Sediaan dicuci dengan alkohol 96 selama 30 detik. Dicuci dengan air mengalir dan
dikering anginkan. Sediaan diberi beberapa tetes safranin lalu biarkan selama 10- 30 detik. Dicuci menggunakan air mengalir setelah itu dikering anginkan dan
diserap dengan kertas saring kemudian diamati di bawah mikroskop SNI, 1992. Kemampuan untuk mencegah penghilangan warna bukan berdasarkan
pada konstruksi dinding sel antara bakteri Gram positif dan bakteri Gram negatif. Dinding sel bakteri Gram negatif memiliki kandungan lipid yang lebih banyak
dan memiliki lapisan peptidoglikan yang lebih tipis daripada dinding sel bakteri Gram positif Leboffe dan Pierce, 2010.
Muatan positif kristal violet melewati dinding sel dan membran sel kemudian berikatan dengan komponen di dalam sel yang bermuatan negatif.
Lugol ditambahkan untuk meningkatkan pewarnaan kristal violet dengan membentuk kompleks kristal violet-lugol. Kemudian dilakukan penghilangan
warna dengan menggunakan alkohol. Pada bakteri Gram negatif, alkohol melarutkan lipid yang terdapat pada membran terluar bakteri Gram negatif dan
meluruhkan kompleks kristal violet-lugol dari sel. Sedangkan pada bakteri Gram positif terjadi dehidrasi karena penetesan alkohol dan menyebabkan tertutupnya
porus selama dehidrasi. Kompleks kristal violet-lugol akan terperangkap dalam lapisan peptidoglikan dan tidak terjadi penghapusan warna. Bakteri Gram negatif
akan mengalami penghilangan warna sedangkan bakteri Gram positif tidak. Lalu dilakukan penetesan safranin yang menyebabkan bakteri Gram negatif akan
menunjukkan warna merah sedangkan Gram positif akan berwarna ungu Leboffe dan Pierce, 2010.