12
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
dalam keadaan asam dan sebaliknya apabila media berwarna merah menandakan bahwa suasana basa. Produksi gas mengindikasikan bahwa telah terjadi
pemecahan medium oleh bakteri.
1.5. Analisis Mikrobiologi Air
1.5.1. Metode Angka Paling Mungkin APM
Metode Angka Paling Mungkin APM atau Most Probable Number MPN atau dalam Farmakope IV disebut sebagai metode tabung ganda
merupakan metode yang digunakan untuk memperkirakan mikroorganisme dalam jumlah yang sedikit, konsentrasi kecil, atau untuk bakteri yang tidak mampu
tumbuh dengan baik pada media padat. Sampelnya dapat berupa susu, makanan, air, dan tanah. Perhitungan APM ini tidak memperhatikan jenis bakteri di dalam
kelompok tersebut apakah termasuk ke dalam Coliform fekal atau pun Coliform non fekal Suriwawiria. 2003.
Kelebihan metode Angka Paling Mungkin Jay, 2000: 1.
Sederhana; 2.
Kelompok organisme yang spesifik dapat ditentukan dengan menggunakan media selektif dan diferensial yang cocok;
3. Metode ini merupakan pilihan untuk menentukan populasi Coliform fekal.
Kekurangan metode Angka Paling Mungkin Suriawiria, 2003: 1.
Hanya dapat menggunakan sedikit sampel air dalam satu kali analisis; 2.
Untuk mendapatkan biakan yang baik dibutuhkan waktu beberapa hari; 3.
Hanya didapatkan perkiraan jumlah Coliform secara kasar; 4.
Membutuhkan banyak alat dan bahan; 5.
Tidak dapat dilakukan di lokasi pengambilan sampel sehingga dibutuhkan sistem pengangkutan tertentu agar tidak terjadi perubahan jumlah bakteri pada
sampel.
13
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
Gambar 2.2 Metode APM
1.5.1.1. Uji Sangkaan
Uji sangkaan merupakan tes pandahuluan untuk melihat ada tidaknya kehadiran bakteri Coliform pada suatu sampel berdasarkan terbentuknya asam dan
gas yang disebabkan karena fermentasi laktosa oleh bakteri kelompok Coliform. Uji ini dilakukan dengan cara menumbuhkan bakteri dalam media Lactose Broth
LB dan diinkubasi selama hingga 48 jam. Hasil positif dan negatif didasarkan pada kekeruhan media dan terbentuk atau tidaknya gelembung pada tabung
durham. Apabila media menjadi keruh dan terbentuk gelembung sebanyak paling tidak 10 dari volume tabung durham maka hasil positif dan sebaliknya apabila
media tetap jernih dan tidak terbentuk gelembung maka hasilnya negatif SNI, 1992; Widyanti dan Ristiati, 2014.
1.5.1.2. Uji Penegasan Confirmed Test
Konfirmasi hasil uji sangkaan perlu dilakukan karena pada uji sangkaan mungkin terdeteksi bakteri non Coliform yang bukan merupakan bakteri indikator
polusi fekal Kiiyukia, 2003. Tabung yang positif terbentuk asam dan gas pada uji sangkaan diinokulasi pada media Brilliant Green Lactose Bile Broth 2
Pengenceran 10
Pengenceran 10
-1
Pengenceran 10
-2
Pengenceran 10
-3
Dilakukan secara 3
replikasi atau 5 replikasi
atau 10 replikasi
Dilakukan secara 3
replikasi atau 5 replikasi
atau 10 replikasi
Dilakukan secara 3
replikasi atau 5 replikasi
atau 10 replikasi
Hasil dari 3 tabung atau 5 tabung atau 10 tabung secara statistik dianalisis tabel APM
