5. Uji kualitatif aktivitas penangkapan radikal bebas DPPH
a. Preparasi pereaksi semprot DPPH
Pereaksi DPPH dibuat dengan konsentrasi 0,2 bv dalam pelarut metanol, lalu dimasukkan dalam wadah gelap dan tertutup Marston, 2011.
b. Uji kualitatif aktivitas penangkapan radikal dengan pereaksi DPPH
Pelat KLT hasil elusi yang telah kering disiapkan untuk disemprot dengan pereaksi DPPH, hasil positif ditandai dengan adanya bercak kuning
dengan latar ungu pada pelat KLT.
6. Uji kualitatif aktivitas UV
protection
a. Preparasi pereaksi �-karoten
Pereaksi �-karoten dibuat dengan konsentrasi 0,05 bv dalam pelarut
kloroform, lalu dimasukkan dalam wadah gelap dan tertutup Marston, 2011. b.
Optimasi intensitas sinar UV Pelat KLT kosong disiapkan, kemudian pelat tersebut dicelupkan dalam
pereaksi �-karoten. Warna diukur dengan parameter warna lalu dicatat. Pelat
tersebut kemudian disinari dengan menggunakan lampu UV. Perubahan warna yang terjadi diamati lalu diukur dengan parameter warna pada menit ke 1, 3, 6,
9, dan 15. Posisi dari lampu UV diatur dalam posisi tinggi 100 cm, sedang 50 cm, rendah 35 cm dan dihitung intensitas sinar dengan alat light meter.
Tiap posisi lampu dilakukan uji dengan replikasi 5 kali. Perubahan warna yang terjadi dicatat lalu dihitung rata-rata dan SD.
c. Uji kualitatif UV protection �-karoten bleaching test
Pelat KLT hasil elusi yang telah dikeringkan beberapa saat dicelupkan dalam pereaksi
�-karoten. Sebelum warna pelat KLT tersebut diukur dengan menggunakan parameter warna lalu dicatat. Pelat KLT tersebut kemudian
disinari sinar UV dengan jarak sesuai hasil optimasi dan dihitung intensitas sinar dengan alat light meter. Perubahan warna yang terjadi diamati lalu
diukur dengan parameter warna pada menit ke 1, 3, 6, 9, dan 15. Replikasi 5 kali dilakukan dan perubahan warna yang terjadi dicatat lalu dihitung rata-rata
dan SD.
7. Uji kualitatif aktivitas antibakteri
a. Pembuatan media TSB cair
Sebanyak 3 g media TSB 30gL dilarutkan dalam 100 mL akuades, diaduk dengan batang pengaduk hingga homogen, kemudian media tersebut
diautoklaf. b.
Pembuatan media agar Sebanyak 3 g media TSB 30gL ditambahkan 1,2 bv agar dilarutkan
dalam 100 mL akuades. Diaduk dengan batang pengaduk hingga homogen, kemudian media tersebut diautoklaf.
c. Pembuatan larutan McFarland 0,5 1,6 x 10
8
CFU Larutan barium klorida 1,175 bv 0,05 mL ditambah 9,95 mL larutan
1 bv asam sulfat Schwalbe, Moore, dan Goodwin, 2007. d.
Pembuatan NaCl 0,9 bv NaCl 0,9 g ditimbang kemudian dilarutan dalam 100 mL akuades.
Kategori