Identifikasi Bakteri dengan Pewarnaan Gram

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta Menurut Jawetz 1982 dalam Khodijah 2006, bila suatu pembenihan cairan ditanam kuman dari suatu biakan yang sebelumnya telah tumbuh sampai jenuh dan jumlah sel-sel hidup ditentukan secara berkala dan digambarkan pada suatu kertas maka biasanya akan diperoleh suatu kurva pertumbuhan. Pertumbuhan bakteri dapat dilihat dari perubahan nilai absrbansi yang didapat setelah dilakukan pengukuran pada menit yang berbeda Sugoro, et al., 2008. Pada kurva pertumbuhan ini, terdapat dua fase, yaitu fase adaptasi dan fase log Gambar 5. Tujuan dari pembuatan kurva pertumbuhan ini adalah untuk mengetahui fase logaritmik dari masing-masing bakteri uji. Fase logaritmik ini merupakan fase yang cocok untuk pengujian antibakteri, karena bakteri uji dalam keadan yang aktif melakukan pembelahan sel dengan laju yang konstan Jauhari, 2010. Menurut Sugoro, et al. 2008, pada fase log terjadi pembelahan sel yang cepat sehingga dinding selnya menipis dan diharapkan aktivitas dari antibateri dapat terjadi secara maksimal. Sel yang paling sensitif adalah sel dengan tingkat proliferasi yang tinggi aktif melakukan pembelahan dan tingkat diferensiasi yang rendah, sedangkan sel yang resisten atau tidak mudah rusak adalah sel dengan tingkat diferensiasi yang tinggi dan tidak melakukan pembelahan. Berdasarkan hasil kurva pertumbuhan yang terbentuk Gambar 5, dapat diketahui bahwa masing-masing bakteri uji memiliki waktu fase logaritmik yang berbeda Tabel 2. Fase log untuk Staphylococcus epideridis, terjadi pada jam ke-4 sapai jam ke-9. Fase log untuk Staphylococcus aureus, terjadi pada jam ke-3 sampai jam ke-15. Fase log untuk Propionibacterium acne terjadi pada jam ke-4 sampai jam ke-9. UIN Syarif Hidayatullah Jakarta Gambar 5. Kurva Pertumbuhan Bakteri Uji Kurva ini dapat dibagi ke dalam 4 fase yaitu fase lag adaptasi, fase log eksponensial, fase stasioner seimbang dan fase kematian penurunan. Pada fase lag atau adaptasi, suatu massa penyesuaikan diri dalam lingkungannya yang baru. Fase log, biasanya pada fase ini ditunjukan dengan garis horizontal pada awal pertumbuhannya. Di sini, populasi bertambah secara teratur, menjadi dua kali lipat pada interval waktu tertentu selama inkubasi. Fase eksponensial, fase ini laju pertumbuhan akan berkurang. Fase stasioner, pada fase ini kehabisan zat makanan atau terjadi penumpukan hasil- hasil metabolisme yang beracun sehingga akan mengakibatkan pertumbuhan terhenti Jawetz, 1982 dalam Khodijah, 2006. Tabel 2. Hasil Kurva Pertumbuhan -1 -0.5 0.5 1 1.5 2 2.5 1 3 5 7 9 11 13 15 17 19 21 23 A b sor b an si OD Waktu jam s.epidermidis S. aureus P.acne Bakteri Uji Fase Lag jam Fase Log jam Staphylococcus epidermidis 1-3 4-9 Staphylococcus aureus 1-2 3-15 Propionibacterium acne 1-3 4-9