digunakan dan dilakukan refluks selama minimal 16 jam sampai pelarut turun kembali ke labu lemak. Pelarut di dalam labu lemak didestilasi dan ditampung.
Labu lemak berisi lemak hasil ekstraksi kemudian dikeringkan dalam oven dengan suhu 105 °C selama 5 jam. Labu lemak kemudian didinginkan dalam
desikator selama 20-30 menit dan ditimbang. Berat residu dalam labu lemak dinyatakan sebagai berat lemak. Kadar lemak dapat dihitung dengan
menggunakan rumus sebagai berikut :
5 Analisis kadar karbohidrat by difference
Kadar karbohidrat dihitung dengan menghitung sisa by diffrerence yaitu dengan rumus sebagai berikut :
3.4.6 Analisis mikrobiologi
Analisis mikrobiologi yang dilakukan adalah dengan penentuan TPC Total Plate Count dengan metode agar tuang. Prinsip metode ini adalah bakteri
mesofil aerob akan tumbuh dengan baik setelah sampel diinkubasi selama 24-48 jam. Sel bakteri akan tumbuh membentuk koloni yang dapat dilihat secara
visual, sehingga dapat langsung dihitung. Mula-mula cawan petri, tabung reaksi dan pipet disterilisasi dalam oven
pada suhu 180 °C selama 2 jam. Media Plate Count Agar PCA dibuat dengan cara melarutkan 8 g PCA dalam 400 ml akuades. Media tersebut disterilkan dalam
autoklaf suhu 121 °C selama 15 menit dengan tekanan 1 atm. Setelah disterlisasi, suhu media dipertahankan 45-55 °C dalam penangas air untuk menjaga agar
media tidak membeku. Pembuatan larutan pengencer garam fisiologis dengan cara melarutkan 8,5 g NaCl dalam 1 liter akuades yang kemudian disterilkan
dalam autoklaf pada suhu 121 °C selama 15 menit. Kadar lemak = Berat lemak gram
X
100 Berat sampel gram
Berat lemak = berat labu + lemak – berat labu
Kadar karbohidrat : 100 - air + abu + protein + lemak
Sebanyak 10 g sosis dihaluskan lalu dilarutkan dalam 90 ml larutan pengencer steril sehingga didapatkan pengenceran 10
-1
. Dari larutan tersebut dipipet 1 ml, kemudian dimasukkan ke dalam tabung reaksi yang telah berisi 9 ml
larutan pengencer steril untuk memperoleh pengeceran 10
-2
, Demikian seterusnya hingga diperoleh penceran 10
-5
, sesuai dengan pendugaan tingkat kebusukan sosis ikan pada saat pengamatan. Dari tiap pengenceran, dipipet 1 ml dan dimasukkan
ke dalam cawan petri steril, setiap pengenceran dilakukan secara duplo. Lalu setiap ke dalam cawan petri tersebut digerakkan di atas meja dengan gerakan
melingkar agar media PCA merata. Setelah PCA membeku, cawan petri diinkubasi dengan posisi terbalik dalam inkubator pada suhu 30 °C selama
48 jam. Setelah waktu inkubasi, koloni yang tumbuh pada cawan petri dapat dihitung dengan jumlah koloni yang diterima 30-300 koloni per cawan. Nilai TPC
produk sosis ikan dapat dihitung dengan menggunakan rumus :
3.5 Rancangan Percobaan dan Analisis Data
