seminggu. Pengamatan masa laten diukur dengan cara meraba menggunakan tangan. Berat jaringan kanker dihitung berdasarkan hasil penimbangan pada
saat terminasi.
3.3.4. Transplantasi sel kanker
Transplantasi dilakukan dengan jalan mematikan 3 ekor mencit donor dengan eter, kemudian kakinya ditelentangkan pada papan fiksasi
dengan jarum Gambar 9. Kulit mencit bagian bawah disterilisasi dengan alkohol 70. Jaringan kanker dari ketiga mencit donor diambil oleh gunting steril, lalu
jaringan kanker dibersihkan dengan larutan PBS di dalam cawan petri di atas es. Jaringan kanker yang sudah bersih ditambahkan dengan larutan PBS lalu
dicacah sampai homogen. Sebanyak 0,2 ml suspensi sel kanker disuntikan dengan jarum trokar secara subkutan pada bagian aksila kanan
mencit resipien yaitu untuk kelompok B, C, D, dan E. Sel kanker yang ditransplantasikan mengandung ± 10
6
sel hidup, sebagai hasil perhitungan menggunakan hemasitometer dengan pewarnaan tryphan blue. Sel kanker hidup
terlihat berwarna bening, sedangkan sel kanker yang mati berwarna biru karena menyerap tryphan blue di bawah pengamatan dengan mikroskop.
3.3.5. Pengamatan masa laten, pengukuran bobot badan dan volume jaringan kanker
Masa laten adalah waktu pertumbuhan kanker dari awal transplantasi sampai kanker dapat diraba dengan menggunakan kepekaan
tangan. Satuan yang digunakan pada pengamatan masa laten ini adalah hari. Setelah masa laten, bobot badan dan volume kanker diukur dua kali
seminggu. Volume kanker diukur menggunakan kaliper merk Tayima untuk mengukur panjang, lebar dan tinggi jaringan kanker Sugiura 1965,
sedangkan bobot badan diukur dengan timbangan OHAUS.
3.3.6. Terminasi dan pengambilan jaringan kanker
Terminasi mencit dilakukan dengan cara dislokasi vertebral yaitu perusakan hubungan antara tulang leher dan kepala yang menyebabkan
rusaknya jaringan syaraf pengatur kesadaran. Setelah mati, mencit ditelentangkan di atas papan fiksasi. Secara makroskopik jaringan kanker
padat yang mengalami nekrosis mempunyai ciri-ciri: berwarna putih pucat seperti
warna kapur terkadang kehiijau-hijauan sampai kuning ditengah-tengah kanker. Selanjutnya jaringan kanker dibagi menjadi dua bagian. Sebagian jaringan
kanker dibuat menjadi sediaan histopatologi untuk pewarnaan HE dan tes Tunel. Sebagian lainnya diekstraksi untuk pengujian ekspresi enzim dan uji
aktivitas.
Gambar 9. Transplantasi, terminasi dan fiksasi jaringan kanker payudara mencit Sumber: Dokumentasi pribadi
Mencit donor Pembedahan
Jaringan kanker Homogenisasi
Mencit resipien Transplantasi sel
kanker Pemberian
ransum Penimbangan
Pengukuran jaringan kanker
Terminasi Fiksasi jaringan
kanker Jaringan kanker
payudara segar
3.3.7. Pembuatan preparat histopatologi dengan pewarnaan HE Panigoro et al. 2007
