29
11. Nilai pH Apriyantono et al., 1989
Sampel sebesar 1 gram ditimbang, kemudian ditambahkan 20 ml air. Kocok dengan stirrer sampai basah sempurna. Kemudian ditambahkan 50 ml air dan dihomogenkan. Biarkan
sampel selama 1 jam. Jangan disaring, biarkan mengendap. Ukur pH supernatan sampel. pH diukur dengan menggunakan pH meter terkalibrasi.
12. Kadar Pati Metode Fenol-Sulfat Dubois et al. 1956 dengan modifikasi
a. Pembuatan larutan fenol 5
Fenol standar pereaksi yang terdistilasi sebanyak 50 gram dilarutkan dalam akuades dan ditepatkan hingga volume 1 liter.
b. Persiapan standar kerja glukosa
Standar glukosa larutan stok dibuat dengan cara melarutkan 100 mg glukosa dalam 100 ml akuades. Kemudian dari larutan stok tersebut diambil sebanyak 10 ml dan dilarutkan dengan
akuades hingga mencapai 100 ml larutan stadar kerja glukosa.
c. Persiapan sampel
Sebanyak 1 gram sampel dimasukkan ke dalam etanol 95, aduk merata. Gula-gula sederhana akan larut dalam etanol sementara pati akan mengendap pada dasar gelas piala. Sampel
yang telah dilarutkan tersebut kemudian disaring menggunakan kertas saring Whatman no. 1. Bilas kembali gelas piala dengan etanol 95 dan pindahkan kembali secara kuantitatif untuk
dilakukan penyaringan. Kertas saring yang terdapat pati basah kemudian dikeringkan dalam desikator semalam. Sampel pati yang telah dikeringkan semalam dikerik dari kertas saring dan
dihaluskan. Ambil sampel pati kering sebanyak 40 mg dan masukkan ke dalam erlenmeyer 100 ml. kemudian larutkan dengan 25 ml akuades dan tutup erlenmeyer dengan alumunium foil.
Panaskan erlenmeyer berisi larutan sampel dengan autoklaf pada suhu 105
o
C selama 60 menit. Angkat dan dinginkan hingga mencapai suhu ruang. Ambil larutan pati dan lakukan pengenceran
40 kali.
d. Analisis kadar pati
Larutan kerja glukosa sebanyak 0.1; 0.2; 0.3; 0.4; 0.5; 0.6; 0.7; 0.8 ml dipipet ke dalam tabung reaksi bertutup dan buat hingga 1 ml. Pipet juga sebanyak 1,0 ml larutan sampel pati ke
dalam tabung reaksi terpisah lakukan duplo. Untuk blanko siapkan 1 ml akuades pada tabung reaksi terpisah. Larutan fenol 5 sebanyak 1 ml ditambahkan pada masing-masing tabung
kemudian vorteks, dan disusul dengan penambahan 5 ml asam sulfat pekat. Diamkan selama 10 menit. Vorteks kembali dan diamkan ada suhu ruang selama 20 menit. Vorteks kembali dan ukur
absorbansi pada panjang gelombang 490 nm.
30
e. Perhitungan kadar pati
Kategori