Uji saponin. Uji Fitokimia Penapisan Fitokimia

28 heteropolifosfotungstat. Pereaksi ini terbuat dari air, natrium tungstat, natrium molibdat, asam fosfat, asam klorida, litium sulfat, dan bromin Folin dan Ciocalteu, 1927: 265-275. Pada kenyataannya reagen ini mengandung rangkaian polimerik yang memiliki bentukan umum dengan pusat unit tetrahedral fosfat PO 4 3- yang dikelilingi oleh beberapa unit oktahedral asam- oksi molibdenum. Campuran Reagen Folin-Ciocalteu terdiri dari fosfomolibídico dan asam fosfotungstat di mana molibdenum dalam keadaan oksidasi VI kompleks 3H 2 O-P 2 O 5 -13WO 3 -5MoO 3 .10H 2 Oberwarna kuning; diman apa bila diberikan suatu agen pereduksi tertentu, seperti fenol, akan membentuk yang disebut tungsten-molybdenum kompleks biru [PMoW 11 O 4 4 ]. Reagen Folin-Ciocalteu dapat membentuk kompleks dengan prinsip oksidasi gugus fenolik hidroksil. Pereaksi ini mengoksidasi fenolat garam alkali, mereduksi asam heteropoli menjadi suatu kompleks molibdenum-tungsten Mo-W. Fenolat hanya terdapat pada larutan basa, tetapi pereaksi Folin-Ciocalteu dan produknya tidak stabil pada kondisi basa. Selama reaksi belangsung, gugus fenolik-hidroksil bereaksi dengan pereaksi Folin-Ciocalteu, membentuk kompleks fosfotungstat-fosfomolibdat kompleks molybdenum-blue berwarna biru mekanisme tertera pada gambar 4. dengan struktur yang belum diketahui dan dapat dideteksi dengan spektrofotometer. Warna biru yang terbentuk akan semakin pekat setara dengan konsentrasi ion fenolat yang terbentuk, artinya semakin besar konsentrasi senyawa fenolik maka semakin banyak ion fenolat yang akan 29 mereduksi asam heteropoli sehingga warna biru yang dihasilkan semakin pekat Singleton dan Rossi, 1965. Gambar 4.Persamaan reaksi dalam perubahan warna folin kuning menjadi kompleks molybdenum biru Pada metode Folin-Ciocalteu ini sebelum penambahan reagen Folin ditambahkan terlebih dahulu Na 2 CO 3 yang bertujuan untuk mendeprotonasi senyawa fenolik sehingga menjadi anion fenolat, dalam penelitian ini digunakan standar asam galat untuk menentukan kadar fenolik total dalam ekstrak. Setelah itu, terjadi reaksi redoks antara anion fenolat dan Folin, dimana menurut untuk Singleton Orthofer dan Lamuela-Raventos, molibdenum, komponen reaktan Folin mengalami pengurangan dan bereaksi berubah warna dari kuning menjadi biru seperti tertera pada gambar 5.