Metode Pengumpulan Data .1 Data Primer
                                                                                48
secara terpisah hingga homogen. 2. Setelah homogen larutkan PCA dan larutan endo agar di pindahkan
ke  dalam  tabung  glass  dan  ditutup  rapat  dengan  kapas,  kemudian dimasukkan  ke  dalam  autoklaf  selama  2  jam  setelah  itu  diangkat
dan dibiarkan hangat kuku. 3. Diambil  1  ml  dari  sampel  dengan  menggunakan  pipet  dan
dituangkan  ke  petridish yang  sudah  steril.  Kemudian  ditambahkan PCA  yang  steril  sebanyak  masing-masing  15  ml    dilakukan
dengan  cara  yang  sama  untuk  sampel  berikutnya,  lalu  petridish digoyangkan  sampai  merata  dan  petridish  dimasukkan  ke  dalam
inkubator dengan suhu 37°C selama 2x24 jam. 4. Sebaliknya dengan media endo agar dituangkan ke dalam petridish
lalu dimasukkan ke dalam lemari pendingin. 5. Di  ambil  ose  cincin  lalu  dibakar  diatas  api  bunsen  tunggu  sampai
dingin,  kemudian  diambil  2  atau  3  koloni  pada  nutrient  agar  lalu dimasukkan ke dalam inkubator 37°C selama 15 menit.
6. Setelah 15 menit diambil kembali ose cincin lalu dibakar diatas api Bunsen  sehingga  dingin,  kemudian  dicelupkan  ke  dalam  larutan
Bouillon    laktosa  lalu  ose  cincin  digoreskan  diatas  media  endo agar yang steril secara zigzag. Kemudian endo agar dimasukkan ke
dalam incubator 37°C selama 24-28 jam. 7. Pertumbuhan  koloni  diamati.  Bila  kolini  berwarna  merah  metalik
dan  bentuk  koloninya  bulat  cembung  serta  dikelilingi  oleh  warna
49
kemerahan  positif.  Jika  terlihat  terang  dan  tidak berwarna  serta  di sekitar koloni berwarna merah muda berarti negatif.