Metode Pengumpulan Data .1 Data Primer
48
secara terpisah hingga homogen. 2. Setelah homogen larutkan PCA dan larutan endo agar di pindahkan
ke dalam tabung glass dan ditutup rapat dengan kapas, kemudian dimasukkan ke dalam autoklaf selama 2 jam setelah itu diangkat
dan dibiarkan hangat kuku. 3. Diambil 1 ml dari sampel dengan menggunakan pipet dan
dituangkan ke petridish yang sudah steril. Kemudian ditambahkan PCA yang steril sebanyak masing-masing 15 ml dilakukan
dengan cara yang sama untuk sampel berikutnya, lalu petridish digoyangkan sampai merata dan petridish dimasukkan ke dalam
inkubator dengan suhu 37°C selama 2x24 jam. 4. Sebaliknya dengan media endo agar dituangkan ke dalam petridish
lalu dimasukkan ke dalam lemari pendingin. 5. Di ambil ose cincin lalu dibakar diatas api bunsen tunggu sampai
dingin, kemudian diambil 2 atau 3 koloni pada nutrient agar lalu dimasukkan ke dalam inkubator 37°C selama 15 menit.
6. Setelah 15 menit diambil kembali ose cincin lalu dibakar diatas api Bunsen sehingga dingin, kemudian dicelupkan ke dalam larutan
Bouillon laktosa lalu ose cincin digoreskan diatas media endo agar yang steril secara zigzag. Kemudian endo agar dimasukkan ke
dalam incubator 37°C selama 24-28 jam. 7. Pertumbuhan koloni diamati. Bila kolini berwarna merah metalik
dan bentuk koloninya bulat cembung serta dikelilingi oleh warna
49
kemerahan positif. Jika terlihat terang dan tidak berwarna serta di sekitar koloni berwarna merah muda berarti negatif.