358 persenyawaan KNO
3
. y Larutan stok C untuk
persenyawaan CaCl
2
.2H
2
O. y Larutan stok D untuk
persenyawaan MgSO
4
.7H
2
O dan KH
2
PO
4
. y Larutan stok E untuk
persenyawaan FeSO
4
.7H
2
O dam Na2EDTA
y Larutan Stok A, 1 liter 50 kali konsentrasi
Menimbang persenyawaan NH
4
NO
3
sebanyak 83.50 gram. Bahan yang telah ditimbang,
dimasukkan ke dalam gelas piala bersih yang sudah berisi aquadest
atau air bebas ion kira-kira 700 ml. Kemudian diaduk hingga larut
merata. Larutan, kemudian dipindahkan ke dalam labu takar 1
liter yang telah dibilas dengan aquadest. Gelas piala dibilas
dengan aquadest dan air bilasan dituang ke dalam labu takar
sebaiknya bilaslah dengan 50 ml aquadest 2-3 kali. Kemudian
ditambahkan aquadest hingga volume larutan tepat pada 1 liter.
Larutan telah jadi, lalu dipindahkan ke dalam erlenmeyerbotol reagent
ukuran 1 liter yang bersih, diberi label A dan ditutup rapat. Larutan
stok A dapat disimpan pada suhu kamar. Untuk membuat 1 liter
media, dibutuhkan 20 ml larutan stok A.
a. Pembuatan Media
Dewasa ini beberapa media kultur jaringan dapat dibeli dalam bentuk
bubuk yang telah dipersiapkan. Tergantung dari jenisnya, ada yang
hanya mengandung garam makro dan mikro serta vitamin, ada juga
yang lengkap sampai hormon dan gula. Formula ini memang
memudahkan pekerjaan, tapi
untuk suatu penelitian yang memerlukan perubahan komposisi
dalam satu atau beberapa komponen, maka pemisahan
komponen-komponen penyusun media perlu dilakukan.
Dalam pembuatan media, langkah pertama adalah membuat
stok dari media terpilih. Penggunaan larutan stok
menghemat pekerjaan menimbang bahan yang berulang-ulang setiap
kali membuat media. Selain itu, juga kadang-kadang timbangan
yang dibutuhkan untuk menimbang jumlah kecil tidak tersedia dalam
laboratorium. Setiap larutan stok dapat dipergunakan untuk kira-kira
50 liter-media, bahkan larutan stok mikro dapat dipergunakan sampai
200 liter media. Larutan stok,, bila dapat disimpan ditempat yang
bertemperatur rendah dan gelap.
Pembuatan larutan stok berdasarkan pengelompokan dalam
stok makro, stok mikro, stok Fe, stok vitamin dan stok hormon
terutama bila larutan stok tidak disimpan ter-lalu lama segera
digunakan habis. Stok hormon dapat disimpan antara 2-4 minggu,
sedangkan stok hara dapat disimpan 4-8 minggu. Dengan
adanya larutan stok, pembuatan media selanjutnya hanya dengan
teknik pengenceran dan pencanpuran saja.
Hal yang perlu diperhatikan dalam pembuatan larutan stok
adalah penyimpanan daya simpan larutan. Larutan yang sudah
mengalami pengendapan, tidak dapat digunakan lagi.
Di unduh dari : Bukupaket.com
Tehnik pembenihan Tanaman 359
Pengendapan larutan stok umumnya terjadi bila kepekatan
larutan terlalu tinggi. Oleh karena itu pengendapan larutan dapat
dihindari dengan membuat larutan yang tidak terlalu pekat atau tidak
menggunakan larutan campuran, yaitu dengan menbuat satu larutan
stok hanya untuk satu jenis bahan terutama untuk unsur hara makro.
Kondisi simpan juga perlu diperhatikan, karena ada beberapa
bahar yang tidak tahan dalam suhu tinggi atau cahaya. Larutan stok
kadang-kadang ditumbuhi mikroba. Larutan stok yang
terkontaminasi mikroorganisme ini, juga tidak dapat digunakan
lagi. Oleh karena itu kondisi simpan harus dijaga kebersihan
dan tempat wadah larutan harus diusahakan. serapat mungkin.
b. Stok hara makro