f. Kromatografi lapis tipis KLT untuk konfirmasi hasil kromatografi
kolom gradien Setiap 2 mL hasil kolom kromatografi dikumpulkan, KLT dilakukan dan
diamati profil KLT nya. Profil KLT hasil kolom kromatografi yang sama disatukan, kemudian dipekatkan dan dihitung rendemen hasil.
g. Penyimpanan isolat
Isolat hasil pemekatan dilarutkan mengguanakan pelarut yang sesuai dengan konsentrasi 1 mg100 µL, kemudian dipekatkan dan disimpan dalam
freezer .
12. Uji kualitatif aktivitas penangkapan radikal bebas isolat senyawa
ekstrak kacang hijau
a. Preparasi sampel
Isolat ekstrak kacang hijau disiapkan dengan konsentrasi masing-masing 1mgmL dengan menggunakan pelarut yang sesuai.
b. Kromatografi lapis tipis KLT isolat senyawa ekstrak kacang hijau
Sampel isolat di totolkan pada pelat kromatografi lapis tipis KLT masing-masing isolat 10; 20; 30 µL, sehingga diperoleh mass loading, yaitu
10; 20; 30 µg pada pelat KLT tersebut, dielusi dengan jarak elusi 5 cm menggunakan fase gerak kloroform : metanol 7:3 vv dan dikeringkan pada
suhu ruang. c.
Uji kualitatif penangkapan radikal bebas Pelat KLT hasil elusi yang telah kering disiapkan untuk disemprot
dengan pereaksi DPPH 0,2 bv dalam metanol, hasil positif ditandai dengan adanya bercak kuning-putih dengan latar ungu pada pelat KLT. Perubahan
warna pada pelat KLT dari ungu menjadi kuning-putih diamati dan diukur waktu perubahan warnanya.
13. Uji kualitatif aktivitas
UV protection isolat senyawa ekstrak kacang hijau
a. Preparasi sampel
Isolat ekstrak kacang hijau disiapkan dengan konsentrasi masing-masing 1mgmL dengan menggunakan pelarut yang sesuai.
b. Kromatografi lapis tipis KLT isolat senyawa ekstrak kacang hijau
Sampel isolat di totolkan pada pelat kromatografi lapis tipis KLT masing-masing isolat 10; 20; 30 µL, sehingga diperoleh mass loading yaitu 10;
20; 30 µg pada pelat KLT tersebut, dielusi dengan jarak 5 cm menggunakan fase gerak kloroform : metanol 7:3 vv dan dikeringkan pada suhu ruang.
c. Uji kualitatif UV protection
Pelat KLT hasil elusi yang telah kering dicelupkan dalam pereaksi � −karoten 0,05 bv dalam kloroform, sebelum dimasukan dalam kotak
flouresensi warna pelat KLT tersebut diukur dengan menggunakan parameter warna. Pelat KLT tersebut kemudian disinari sinar UV dalam kotak flouresensi
hasil optimasi dan dihitung intensitas sinar dengan alat light meter, diamati tiap menit ke 1, 3, 6, 9, dan 15.
14. Uji kualitatif aktivitas antibakteri isolat senyawa ekstrak kacang
