30 terdapat residu lemak. Selanjutnya cawan aluminium dimasukkan ke dalam oven vakum
selama 10 menit dan didinginkan di dalam desikator hingga mencapai berat konstan. Berat residu dinyatakan sebagai persentase lemak yang terdapat dalam sampel susu dan dihitung
dengan persamaan: Lemak ww
=
–
8
c. Kadar Sukrosa IDF 35:2004, 2004
Metode yang digunakan pada penetapan kadar sukrosa adalah metode polarimetri. Prinsip metode ini adalah mengukur perubahan rotasi optik dengan menggunakan
polarimeter. Sampel recovery ditimbang 16.3 gram dan dimasukkan ke dalam labu takar 200 ml. Selanjutnya ditambahkan 50 ml air destilata dan diaduk. Selanjutnya ammonia 7
ditambahkan sebanyak 1 ml, diaduk, dan didiamkan selama 20 menit. Setelah 20 menit, sampel selanjutnya ditambahkan 5 ml asam asetat 25, 5 ml larutan K
4
FeCN
6
, 5 ml larutan seng asetat, dan air destilata hingga tanda tera pada labu ukur. Larutan sampel
tersebut dipastikan harus dikocok setiap penambahan pereaksi. Sampel yang telah ditambahkan pereaksi selanjutnya disaring melalui kertas saring
ke dalam erlenmeyer 300 ml. Erlenmeyer yang digunakan dipastikan dalam keadaan bersih dan kering. Larutan yang disaring disebut P1. Sebanyak 50 ml larutan hasil penyaringan
dipindahkan ke dalam labu takar 50 ml, ditambahkan 5 ml HCl 30 untuk menghidrolisis sukrosa sehingga menghasilkan laktosa dan beberapa gula yang tidak mempengaruhi
pengukuran, dan dikocok. Larutan sampel dalam labu ukur 50 ml disebut P2. Selanjutnya P2 direndam dalam waterbath 60
o
C selama 15 menit dan didinginkan hingga suhunya sama dengan suhu larutan P1. Seluruh larutan P2 harus dipastikan terendam. Kadar sukrosa
sampel selanjutnya dibaca dengan menggunakan polarimeter pada λ = 546 nm. Adapun perhitungan kadar sukrosa :
9 dimana :
P1 = larutan sampel hasil penyaringan di Erlenmeyer P2 = larutan sampel hasil penyaringan di labu ukur 50 ml
K = konstanta susu cair = 0.00 1.0402 = gaya berat sukrosa
1.1 = faktor konversi sukrosa
d. Kadar Protein AOAC 991.20, 2006
Metode yang digunakan adalah metode Kjeldahl. Metode ini menganalisis kadar protein kasar dalam bahan makanan secara tidak langsung berdasarkan kadar nitrogennya.
Persen protein dihitung dengan mengalikan hasil analisis dengan faktor konversi 6.38. Nilai faktor konversi 6.38 berdasarkan pada protein murni yang mengandung 15.67
nitrogen pada produk susu Winarno 2008. Prinsip metode ini adalah destruksi, destilasi dan titrasi. Dekomposisi senyawa nitrogen organik melalui tahap destruksi dengan asam
sulfat pekat dan katalis membentuk ammonium sulfat, kemudian didestilasi dengan natrium hidroksida membentuk gas ammonia yang bereaksi dengan asam borat. Banyaknya asam
31 borat yang bereaksi dengan ammonia dapat diketahui melalui tahap titrasi menggunakan
larutan asam klorida dengan indikator Conway Brom Cresol Green : Metil Merah 1:1. Titik akhir titrasi ditandai dengan terbentuknya warna merah muda.
Sebanyak 2.5 g sampel recovery dimasukkan ke dalam tabung pedal dan diletakkan pada digestion block, kemudian ditambahkan 2 butir tablet Kjeldahl mengandung K
2
SO
4
dan CuSO
4
, 20 ml asam sulfat pekat, larutan dikocok hingga larut dan didiamkan selama 5 menit. Scrubber cup dipasangkan pada digestion block dan digestion block diletakkan pada
FOSS Digestor, kemudian sampel didestruksi selama 3 jam 1 jam pada suhu 200
o
C dan 2 jam pada suhu 400
o
C. Setelah dingin ditambahkan 50 ml air destilata. Tahap selanjutnya yaitu destilasi dilakukan dengan penambahan natrium hidroksida 40. Gas ammonia yang
dihasilkan ditampung dengan menggunakan larutan asam borat 3. Sampel dititrasi menggunakan HCl 0.1 N dan hasil titrasi ditampilkan di layar alat Kjeltech. Penetapan
blanko dilakukan dengan cara yang sama tanpa menggunakan sampel. Adapun perhitungan kadar protein:
Protein
-
10
dimana: N HCl = normalitas HCl 0.1 N
BM = berat molekul protein
FK = Faktor konversi untuk susu = 6.38
4. Analisis Statistik
a. Standard Error of Calibration SEC EMEA 2012
Standard Error of Calibration SEC adalah perhitungan statistik yang menghitung perbedaan antara nilai prediksi NIRS dengan nilai hasil pengukuran menggunakan metode
konvensional pada tahap kalibrasi. Pada tahap kalibrasi metode spektroskopi NIRS digunakan 23 data dari keseluruhan sampel. SEC 1 menunjukkan model yang semakin
baik. Standard Error of Calibration SEC diperoleh dengan menggunakan persamaan sebagai berikut:
√
∑
- -
11 dimana:
Y
lab
= nilai hasil analisis metode konvensional Y
NIR
= nilai hasil analisis metode NIR n
= jumlah sampel p
= jumlah koefisien faktor
