Cara Pewarnaan 1. Ziehl-Neelsen Direct Smear Examination:
- Pembenihan yang telah ditanami disimpan pada inkubator 37
o
C sampai sekurang-kurangnya 4 minggu dan diamati setiap minggunya.
1
Pemeriksaan kultur dengan medium Lowenstein Jensen dipersiapkan sesuai dengan petunjuk pembuatan produsennya BBL,Merck. Medium tersebut
dipersiapkan dengan cara sebagai berikut: a. Alat dan bahan:
- Pipet 10 ml. - Tabung pembenihan 20x150 mm dengan tutup baling-baling screw
capped tubes. - Rak tabung.
- Basis medium Lowenstein-Jensen Merck 18,65 gram - Inkubator.
- Aquadest 300 ml. - Gliserol grade reagen 6 ml.
- Telur utuh 500 ml. b. Cara kerja:
- Ditimbang sebanyak 18,65 gram basis medium LJ. - Dilarutkan dalam 300 ml air destilata.
- Ditambahkan 6 ml gliserol grade reagen dan diaduk hingga homogen. - Larutan tersebut disterilkan dalam autoklaf pada suhu 121
o
C selama 30 menit, kemudian didinginkan.
- Ditambahkan 500 ml telur utuh yang telah dihomogenkan terlebih dahulu ke dalam medium, diaduk hingga homogen.
- Sekitar 6-8 ml medium dituangkan ke dalam tube bertutup baling-baling screw capped tubes dengan ukuran 20x150 mm.
- Tube tersebut kemudian disimpan pada suhu 80
o
C selama 50 menit. - Untuk pemeriksaan sterilitas medium, medium yang telah disiapkan
tersebut diinkubasi dalam inkubator pada suhu 37
o
C selama 48 jam, kemudian disimpan dalam refrigerator untuk penyimpanan ketika tidak
ditemukan kontaminan.
22
Jumlah koloni Mycobacterium tuberculosis yang tumbuh dalam biakan dihitung dan dilaporkan sebagai berikut:
- 1-19 koloni : Jumlah koloni yang terlihat. - 1+
: 20 - 100 koloni.
17
- 2+ : 101 - 200 koloni.
- 3+ : 201 - 500 koloni.
- 4+ : 500 koloni.