BAHAN DAN METODE PENELITIAN 1. Waktu dan Tempat

sumber lemak, tepung maizena alpha corn starch merk Honing sebagai sumber energi, CMC carboxyl methyl cellulose sebagai sumber selulosa, Bekamin 10 Kimia Farma yang pada tiap tabletnya mengandung vitamin A 1500 SI, tiamin 1 mg, riboflavin 0,5 mg, piridoksin 0,5 mg, niasin 10 mg, vitamin B 5 mg, asam folat 0,5 mg, vitamin B 12 0,5 mg, vitamin C 25 mg, vitamin B 5 dan vitamin D 2 Tabel 3 Komposisi mineral untuk pakan mencit 150 SI. Komposisi mineral diperoleh dari Laboratorium Biokimia Pangan dan Gizi, Fakultas Teknologi Pertanian IPB dengan komposisi yang disajikan dalam Tabel 3. Peralatan dalam pembuatan pakan meliputi wadah baskom, spatula, kantong plastik, alat pencetak pelet dan drum dryer. Jenis mineral Jumlah dalam 100 g NaCl 139,30 KI 0,79 KH 2 PO 389 4 MgSO 4 .7H 2 57,30 O CaCO 381,40 3 FeSO 4 . 7H 2 27 O MnSO 4 . 7H 2 4,01 O ZnSO 4 . 7H 2 0,55 O CuSO 4 . 5H 2 0,48 O CoCl 2 . 6H 2 0,02 O Bahan untuk pengujian in vivo adalah mencit Mus musculus L C3H, baik donor maupun resipien. Mencit C3H berasal dari Laboratorium Patologi Eksperimental, Departemen Patologi Anatomik, Fakultas Kedokteran, Universitas Indonesia. Bahan kimia yang digunakan untuk pengolahan jaringan adalah formalin, larutan Bouin, asam asetat glasial, paraffin, xylol, etanol 70 dan 60, larutan PBS phosphate buffer saline, larutan NaCl fisiologis dan neofren. Peralatan untuk pengolahan jaringan meliputi oven, cetakan antikarat, forsep, lemari pendingin serta gelas objek dan penutupnya. Bahan yang digunakan untuk pewarnaan HE dan IHK adalah jaringan tumor payudara mencit C3H. Bahan khusus untuk pewarnaan HE meliputi pewarna hematoksilin dan eosin. Bahan khusus untuk pewarnaan IHK meliputi antibodi primer anti-CD31 rabbit antimouse dari Biorbyt nomor katalog orb10315, antibodi primer antikaspase-3 rabbit antimouse dari Cell Signaling Technology nomor katalog 9662, antibodi sekunder antirabbit IgG HRP-linked antibody goat antirabbit dari Cell Signaling Technology nomor katalog 7074