Pengawasan Mutu Bahan Produk Pangan 287
sampai menyentuh dinding tabung reaksi.
e. Apus ke atas permukaan agar dengan perlahan-lahan seca-
ra merata. Ingat, usahakan jangan sampai agar hancur
atau tergores.
f. Lakukan proses iInkubasi dan amati pertumbuhan koloni
mikroba.
14.3.1.3 Teknik Pour Plate Teknik pour-plate lempeng tu-
ang adalah teknik inokulasi mi- kroba di dalam media agar de-
ngan cara mencampurkan media agar yang masih cair dengan
kultur mikroba. Teknik lempeng tuang biasa
digunakan pada uji TPC Total Plate Count
. Kelebihan teknik ini adalah mikroba yang tumbuh
dapat tersebar merata pada media agar.
Adapun tahan kerja teknik lem- peng tuang adalah sebagai beri-
kut : a Pipet beberapa ml kultur mik-
roba dan campurkan dengan beberapa ml aquades sesuai
dengan pengenceran yang di- kehendaki.
b Aduk hingga merata dengan cara memutar tabung reaksi
menggunakan kedua telapak tangan selama beberapa kali.
c Pipet larutan tersebut seba- nyak + 1 ml ke dalam cawan
petri. d Tuang media agar yang ma-
sih cair suhu + 50
o
C ke dalam cawan petri tersebut
Gambar 14.11. e Putar cawan petri secara per-
lahan-lahan di atas meja horizontal untuk mengaduk
campuran media agar dengan kultur mikroba.
f Lakukan proses inkubasi dan amati pertumbuhan koloni
bakteri.
Di unduh dari : Bukupaket.com
Pengawasan Mutu Bahan Produk Pangan 288
menggunakan isolat yang berasal dari campuran kultur agar streak-
plate danatau spread plate. Adapun prinsipnya adalah koloni
yang telah disebar dengan baik akan berkembang pada permuka-
an media agar. Masing-masing mikroba dapat dipindahkan de-
ngan jarum steril dan ditum- buhkan pada media agar miring
agar slant. Masing-masing me- dia agar miring mewakili pertum-
buhan dari satu spesies mikroba dan dirancang sebagai kultur
murni atau cadangan stock. Pembuatan media agar miring
adalah sebagai berikut : a Tuang media agar ke dalam tabung
reaksi secara aseptis dan b Dinginkan agar pada tabung re-
aksi dalam keadaan miring + 20- 30
Prosedur pembuatan kultur murni pada media agar miring adalah
sebagai berikut : a Gunakan pinsil lemak untuk
menandai tabung reaksi berisi nutrien agar miring.
b Transfer secara aseptik mi- kroba dari media streak-plate
danatau spread plate dengan prosedur sebagai berikut : 1
Bakar jarum ose hingga ka- wat berpijar merah dan di-
inginkan; 2 Setelah dingin, sentuhkan jarum ke koloni mi-
kroba yang diingin-kan pada agar lempeng gores sebar;
3 Buka tutup tabung agar miring dan lewatkan le-her
tabung secara cepat me-lalui api pembakar Bunsen; 4
Inokulasi agar miring dengan cara menggeser jarum ose
dari bawah ke arah atas membentuk gerakan zigzag
sepanjang permukaan agar. Jangan sampai menggali ke
dalam media agar atau me- rusak permukaan media agar.
c Panaskan kembali leher ta- bung reaksi dan tutup kem-
bali. d Bakar jarum inokulasi dan
simpan. e Inkubasi ke dalam inkubator
dan amati bentuk koloni yang tumbuh. Lama proses inku-
basi juga mempengaruhi per- hitungan mikroba. Perhitung-
an mikroba yang diinkubasi- kan selama 18 jam memberi-
kan hasil lebih baik dibanding- kan 24 jam. Namun demiki-
an, beberapa mikroba mem- butuhkan masa inkubasi lebih
lama lagi.
14.4 Pengujian Mikrobiologi 14.4.1 Penanganan Sampel
