Variabel bebas Prosiding Hasil hasil Penelitian Teknologi

Seminar Nasional Hasil-hasil Penelitian Teknologi, MIPA dan Pendidikan Vokasi 515 Prosedur Kerja 1. Penanaman Streptococcus sp ke dalam medium garam empedu yang ditambahkan 0,2 sodium thioglycholat. Isolat Streptococcus sp yang telah diinokulasikan sebanyak 1 dari kultur biakan murni ke dalam medium pertumbuhan MRS yang mengandung 0,2 sodium thioglycholate. Volume medium untuk setiap tabung sebanyak 10 ml. Konsentrasi garam empedu dalam medium diatur dari 0 , 0,1 . 0,3 , 0,5 , 0,7 , dan 0,9 . Masing-masing perlakuan dilakukan 3 kali ulangan. Sebagai kontrol media tidak ditambahkan garam empedu. Derajat keasaman pH pada awal fermentasi ditepatkan pada pH 6,5. Selanjutnya dilakukan inkubasi pada suhu 40 ° C.

2. Pertumbuhan Streptococcus sp pada media garam empedu

Streptococcus sp diikuti pertumbuhannya selama fermentasi dengan mengukur perubahan densitas medium. Perubahan densitas yang diukur menggunakan spektrofotometer dengan panjang gelombang 650 nm Pereira dan Gibson, 2002. Pengamatan dilakukan tiap jam selama 20 jam sampai diperoleh densitas yang cenderung konstan pada pengamatan yang berbeda. 3. Analisis kadar asam laktat a Tahap Isolasi 1. 1 ml kultur bakteri dimasukkan stamper yang berisi TCA 10 , kemudian filtrat ditampung pada tabung sentrifugasi. Vortex sambil ditambah TCA 10 sampai volume filtrat 5 ml. Filtrat disentrifugasi 2300 rpm selama 15 menit. 2. 1 ml supernatan dimasukkan tabung sentrifugasi dan ditambah 0,5 ml larutan CuSO 4 20 + aquades hingga volume 5 ml. Kemudian ditambah 0,5 gr CaOH 2. Untuk blanko supernatan diganti aquades. 3. Memvortex sampai homogen dan membiarkannya selama 30 menit kemudian disentrifugasi 2750 rpm selama 15 menit. b Tahap Penentuan 1. 0,5 ml supernatan + 0,025 ml CuSO 4 + 3 ml H 2 SO 4 pekat divortex dididihkan 5 menit kemudian didinginkan pada air es hingga suhu 20°C +0,05 ml larutan p-hidroksibiphenil. Inkubasikan pada suhu 30°C selama 30 menit. Kemudian didihkan selama 90 detik, dinginkan pada suhu kamar. 2. Meneranya dengan spektrofotometer pada 560 nm