Kesimpulan dan Saran Ucapan Terima Kasih Daftar Pustaka

56 57 Hasil ampliikasi DNA T. gondii pada mencit yang diinfeksi inokulat jantung dan otak ayam buras tidak terlihat pita DNA dari hasil elektroforesis. Hasil ini mengindikasikan bahwa DNA T. gondii berasal dari mencit yang diinfeksi inokulat jantung dan otak ayam buras dengan primer sag-1 tidak berhasil diampliikasi menggunakan metode PCR. Hasil elektroforesis dari produk PCR ternyata tidak muncul pita DNA Gambar 2, hal ini kemungkinan karena DNA yang diampliikasi kuantitasnya terlalu rendah tidak mencukupi untuk ampliikasi secara PCR atau kemurnian DNA yang kurang sehingga terganggu oleh kehadiran protein atau fenol yang dapat mengganggu PCR. Kemurnian DNA 1,5 – 1,8 masih memenuhi standar murni Sambrook and Russell, 2001, demikian pula konsentrasi minimal 1 µgµl DNA template diperlukan untuk PCR Brown, 2006 [2] . Sampel organ untuk isolasi DNA berasal dari mencit yang diinfeksi inokulat jantung dan otak ayam buras dan sudah ditera titer serumnya. Mencit yang dipilih untuk sampel deteksi molekuler T. gondii adalah yang mengalami peningkatan titer serum dari preinokulasi, 2 minggu I inokulasi dan 2 minggu II inokulasi, hal ini dimaksudkan untuk memastikan bahwa terjadi respon antibodi IgG yang terus meningkat selama infeksi. Sesuai pendapat Jacobs et al.1960 bahwa hewan dengan titer antibodi 1:2048, pada ototnya kemungkinan mengandung T. gondii sehingga dapat diproses untuk ekstraksi sistanya [1] . Pada penelitian ini organ yang dipilih untuk pemeriksaan molekuler dengan PCR berasal dari mencit yang mempunyai titer serum 512 – 1024 EU. Hasil ini mengindikasikan bahwa titer serum pada mencit 1024 EU tidak disertai dengan kehadiran sista T. gondii pada organnya, sehingga tidak dapat dideteksi secara molekuler.

4. Kesimpulan dan Saran

Pemeriksaan molekuler T. gondii pada mencit yang diinfeksi inokulat jantung dan otak ayam buras, tidak berhasil dideteksi. Disarankan untuk melakukan uji kualitas kemurnian dan kuantitas konsentrasi DNA untuk mendapatkan hasil PCR yang maksimal.

5. Ucapan Terima Kasih

Kepada DP2M DIKTI terimakasih atas bantuan dana penelitian melalui Hibah Penelitian Fundamental dan kepada semua pihak yang ikut terlibat dalam penelitian ini, terimakasih atas bantuan tenaga serta dukungannya.

6. Daftar Pustaka

[1] Tenter, A.M.; Heckeroth, A.R.; Weiss, L.M. 2000. Toxoplasma gondii : From Animals to humans. Int.J.of Parasitol. 30 : 1217-1258. [2] Subekti, D.T.; Artama, W.T. dan Iskandar, T. 2005. Perkembangan kasus dan Teknologi diagnosis Toksoplasmosis. Lokakarya Nasional Penyakit Zoonosis. Bogor. [3] Priyana, A.2000. Antibodi Anti Toxoplasma pada Ayam Kampung Gallus domesticus di Jakarta. Majalah Kedokteran Indonesia. 5011: 504-507. [4] Mufasirin; Suprihati, E dan Suwanti, L.T. 2003. Studi Toksoplasmosis pada Telur Ayam yang dijual sebagai campuran jamu di kota Surabaya dan Kabupaten Sidoarjo menggunakan uji Dot Blot. Jurnal Penelitian Medika Eksakta. 42: 113-119 [5] Suwanti, LT.; Suprihati, E.; Mufasirin. 2006. Prevalensi Toxoplasmosis pada Ayam di beberapa Pasar di kota Surabaya. Media Kedokteran Hewan. 221: 32-35. [6] Shojaee, S.; Rezaei, S. and Keshavarz. 2007a. Detection of Toxoplasma gondii from sera and urine of experimentally infected mice by PCR. Pak J Biol Sci. 101: 193-195. [7] Janitschke, K. 1999. Animal Models of Toxoplasma Infection.Handbook of Animal Models of Infection. Academic Press : 811-820. [8] Nguyen, T.D.; De Kesel, M.; Bigaignon, G.; Hoet, P.; Pazzaglia, G.; Lammens, M. And Delmee, M. 1996. Detection of Toxoplasma gondii Tachyzoites and Bradyzoites in Blood, Urine and Brain of Infected Mice. Clinical and Diagnostic Laboratory Immunology 36 : 635 – 639. [9] Jensen, I.; Heegaard, P.M.H. and Lind, P. 1998. A Study of virulence parameter for Toxoplasma gondii infection in mice. Parasitol Res. 84 : 382 – 387. [10] Dubey, J.P.; Shen, S.K.; Kwok, O.C.H.and Frenkel, J.K. 1999.Infection and Immunity with the strain of Toxoplasma gondii in Rats and Mice. J.Parasitol. 854 : 657-662. [11] Shojaee, S.; Keshavarz, H. Rezaian, M. And Mohebali, M. 2007b. Detection of Toxoplasma gondii antigens in sera from experimentally infected mice. Pak J Med Sci. 231 : 100 – 102. [12] Peterico, S.B.; Langoni, H.; Da Sila, A.V. and Da Silva, R.C. 2009. Evaluation of Toxoplasma gondi i placental transmission in BALBc mice model. Exp.Parasitol. 123 : 168 – 172. [13] Burg JL, Grover CM., Poeletty P, Boothroyd JC. 1989. Direct and Sensitive Detection of a pathogenic protozoa Toxoplasma gondii by Polymerase chain Reaction. J of Clin Microbiol. 27: 1787–1792 [14] Savva D, Morris JC, Johnson JD, Holliman RE. 1990. Polymerase Chain Reaction from detection of Toxoplasma gondii. J Med Microbiol. 32: 25-31 [15] Hohlield P, Daffos F, Costa JM, Thulliez P, Forestier F, Vidaud M. 1994. Prenatal diagnosis of congenital Toxoplasmosis with Polymerase Chain Reaction test on amniotic luid. The New England J of Med. 331 11 : 695-699. [16] Owen MR, Clarkson MJ, Trees AJ. 1998. Diagnosis of Toxoplasma abortion in ewes by polymerase chain reaction. The Vet Record. 142: 445-448. [17] Susanto L, Supali T, Gandahusada S. 2002. Penentuan konsentrasi minimal Gen B1 dan Gen P30 Toxoplasma gondii yang masih terdeteksi dengan reaksi Rantai Polimerase. Makara Kesehatan 62 : 64-70. [18] Priyowidodo. 2003. Kajian Metoda Diagnosis Toksoplasmosis secara Polymerase Chain Reaction PCR dan Pemeriksaan Hstologis. Tesis. Yogyakarta. Universitas Gadjah Mada. [19] Yuwono T. 2006. Teori dan Aplikasi Polymerase Chain Reaction. Edisi pertama. Yogyakarta. Penerbit Andi. Pp.1-237 [20] Sarva U. and Holliman RE. 1989. Diagnosis of Ovine Toxoplasmosis: an alternative to Serology. Vet Record 125: 212-213. [21] Haid, J.; Flori, P.; Raberin, H. And Tran Manh Sung, R. 2001. Comparison of PCR, Capture ELISA and Immunoblotting for Detection of Toxoplasma gondii in Infected mice. J.Med. Micobiol. 50: 1100-1104. [22] Purwanto, M.; Lusida, M.I. dan Handayani, R. 1997. Polymerase chain reaction. Dalam Biologi Molekuler Kedokteran. Editor Suhartono Taat Putra. Edisi pertama. Erlangga Universiy Press.: 150-16 [23] Sudjadi. 2008. Bioteknologi Kesehatan. Cetakan pertama. Penerbit Kanisius. Pp.21-279. [24] Sambrook, J. and Russell, D.W. 2001. The Basic Polymerase Chain Reaction. In Molecular cloning. A Laboratory manual . Third Ed. Cold Spring Harbor Laboratory Press, NewYork. Vol 2: 8.18 – 8.24. [25] Brown, T.A. 2006. The Basic Principles of Gene Cloning and DNA Analysis. In Gene Cloning and DNA Analysis. An Introduction. Fifth Ed. Blackwell Publishing: 1 – 84 [26] Jacobs, I; Remington, JS. And Milton, MI. 1960. A Survey of meat samples from swine, cattle and sheep for the presence of encysted Toxoplasma. J.Parasitol. 46: 23-26 58 59 Kajian Pola Pertumbuhan dan Aktivitas Antimikroba Isolat Lactococcus lactis spp lactis 1 Asal Cairan Rumen Sapi Bali the study of growth patterns and antimicrobial activity of lactococcus lactis spp lactis 1 isolated from gastric’s luids of bali cattle I Wayan Suardana 1 1 Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Udayana Laboratorium Kesehatan Masyarakat Veteriner, E-mail: iwayansuardana22yahoo.com Abstract Microorganisms are the largest contributor to antimicrobial substances compared with the animals and plants in particular from the group of lactic acid bacteria. The effort for producing antimicrobial substances begins with screening programs by exploiting the microbial world, looking for a diverse strains, thus inding new isolates with the best activity. This aim of study is to identify the antimicrobial activity of lactic acid bacteria isolated from gastric’s luid of Bali cattle i.e Lactococcus lactis spp lactis 1. The study begins with the determination of the growth patterns, determination of timing generation, production and isolation of antimicrobial substances and inally by the determination of the optimum time for producing of antimicrobial substances. The results showed that Lactococcus lactis spp lactis isolates 1 has a lag phase until 2 nd hours, logarithmic phase 2 nd to 5 th hours , stationary phase 5 th to 6 th hours, and death phase was began at 6 th hours with the generation time of isolate was 2.25 hours. The isolate was known having antimicrobial activity that showed by its activity to inhibit the growth of indicator bacteria i.e Staphylococcus aureus ATCC 29213, Bacillus cereus ATCC 11778 and Escherichia coli ATCC 25922 with its optimum time production was on 6 th days. These results indicate that Lactococcus lactis spp lactis isolated 1 has a broad antimicrobial activity broad spectrum so that it will be potentially for further investigation. Keywords: Lactococcus lactis spp lactis 1 , antimicrobial, gastric luid, Bali cattle

1. Pendahuluan